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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » qPCR退火温度
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懒懒姑娘

新虫 (小有名气)
已领完
qPCR退火温度
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退火温度是60时，我的溶解度曲线是第一张图。于是我就去摸条件，引物浓度有保持不变的也有降低一半的，退火温度分别是58,60，62，64，65。结果是图二（Tm＝75.92）我的目的基因是180bp，跑了一个琼脂糖凝胶，只出来了一个不到100bp的带。亲们我该怎么办，改变什么条件呢！

qPCR退火温度


qPCR退火温度-1


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1楼2018-01-27 15:32:44
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取个什么名啊

木虫 (正式写手)
★
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有引物二聚体，重新设计引物
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9楼2018-01-30 11:30:37
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遊俠

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
有没有考虑这个引物，是不是设计的不太合适呢

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8楼2018-01-28 12:00:09
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懒懒姑娘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 取个什么名啊 at 2018-01-30 11:30:37
有引物二聚体，重新设计引物

好的，我和老师商量商量

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10楼2018-01-30 22:36:01
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懒懒姑娘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 遊俠 at 2018-01-28 12:00:09
有没有考虑这个引物，是不是设计的不太合适呢

可能真是引物问题

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

雪色残洋
11楼2018-01-30 22:36:32
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预估预估

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引物问题。是不是有污染！

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12楼2018-02-01 23:33:38
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zhaoshui

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主还在吗？请问你最后问题是怎么解决的？还是换了引物吗？
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13楼2019-05-28 10:53:50
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雪色残洋

铜虫 (小有名气)
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引用回帖:
11楼: Originally posted by 懒懒姑娘 at 2018-01-30 22:36:32
可能真是引物问题
...

想问一下有引物二聚体一般是引物设计不合适吗？是不是要重新设计引物？
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14楼2019-05-31 11:43:59
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4182362852楼
2018-01-27 15:32   回复  
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sjysycbdbd3楼
2018-01-27 15:33   回复  
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随堂测验青青4楼
2018-01-27 15:33   回复  
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杨过0075楼
2018-01-27 15:33   回复  
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andrewhf6楼
2018-01-27 15:33   回复  
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zbg2190017楼
2018-01-27 15:35   回复  
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