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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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一个不小心就

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 蛋白质电泳,SDS-PAGE求指教 已有5人参与

头疼!!求大家指教。
我跑SDS-PAGE的时候胶总是变形,如图所示,蓝色的那条线是溴酚蓝。注意:上样孔有点扭曲,两层胶的分界线不直,这都是跑胶以后造成的。
跑胶条件:60V,跑10h,室温不高于6℃。灌胶的时候充分摇均匀了。

蛋白质电泳,SDS-PAGE求指教
变形凝胶.jpg
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一个不小心就

主管区长

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引用回帖:
2楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2016-01-22 10:47:20
出现过这种情况,但是实在电压太高的情况下出现的。你这个是不是跑太长时间了

我觉的应该是的。但是的蛋白是时间短了跑不开,真是个棘手问题,请问有没有什么建议
6楼2016-01-22 13:54:27
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反应链

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

If electrophorsis is carried out at low temperatures, use lithium dodecyle sulfate (LiDS) instead of SDS. LiDS does not precipitate at low temperatures.
3楼2016-01-22 11:18:26
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一个不小心就

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
4楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-22 12:18:05
跑胶时间太久导致的,一般跑胶两个小时左右就可以了

时间短了条带分不开,即使换成6%的胶也效果也不好,而且似乎更容易变形。请问有什么可以解决的方法吗?
5楼2016-01-22 13:52:27
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swlsangon

版主

快乐的木虫

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引用回帖:
9楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2016-01-22 14:58:02
应该在50kD~100kD左右。跑胶的时候不加变性剂。同时分离胶中含有1%的羧甲基纤维素,这个会阻碍蛋白移动。...

上下层胶你在配的时候要压胶。使界面平滑,然后可能是样品没有煮好。
生命在于运动
10楼2016-01-22 16:33:19
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一个不小心就

专家顾问

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引用回帖:
24楼: Originally posted by sskyy at 2016-01-24 23:19:36
也有可能,加胶之前要加点水水检查是否漏水...

不会漏的,制了好多胶了,老手
29楼2016-01-25 10:43:53
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普通回帖

夏天的普洱茶

专家顾问

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-23 22:43:17
出现过这种情况,但是实在电压太高的情况下出现的。你这个是不是跑太长时间了
2楼2016-01-22 10:47:20
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swlsangon

超级版主

快乐的木虫

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

跑胶时间太久导致的,一般跑胶两个小时左右就可以了
生命在于运动
4楼2016-01-22 12:18:05
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一个不小心就

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by 反应链 at 2016-01-22 11:18:26
If electrophorsis is carried out at low temperatures, use lithium dodecyle sulfate (LiDS) instead of SDS. LiDS does not precipitate at low temperatures.

学到了,受教
7楼2016-01-22 13:54:41
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swlsangon

实习版主

快乐的木虫

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2016-01-22 13:52:27
时间短了条带分不开,即使换成6%的胶也效果也不好,而且似乎更容易变形。请问有什么可以解决的方法吗?...

你的蛋白分子量多大啊?
生命在于运动
8楼2016-01-22 14:37:28
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一个不小心就

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
8楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-22 14:37:28
你的蛋白分子量多大啊?...

应该在50kD~100kD左右。跑胶的时候不加变性剂。同时分离胶中含有1%的羧甲基纤维素,这个会阻碍蛋白移动。
9楼2016-01-22 14:58:02
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