应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白质电泳，SDS-PAGE求指教
381/4返回列表1234下一页
查看: 2808  |  回复: 37
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

一个不小心就

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质电泳，SDS-PAGE求指教 已有5人参与

头疼！！求大家指教。
我跑SDS-PAGE的时候胶总是变形，如图所示，蓝色的那条线是溴酚蓝。注意：上样孔有点扭曲，两层胶的分界线不直，这都是跑胶以后造成的。
跑胶条件：60V，跑10h，室温不高于6℃。灌胶的时候充分摇均匀了。

蛋白质电泳，SDS-PAGE求指教
变形凝胶.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-01-22 10:30:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2016-01-22 10:47:20
出现过这种情况，但是实在电压太高的情况下出现的。你这个是不是跑太长时间了

我觉的应该是的。但是的蛋白是时间短了跑不开，真是个棘手问题，请问有没有什么建议
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2016-01-22 13:54:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

反应链

新虫 (正式写手)
If electrophorsis is carried out at low temperatures, use lithium dodecyle sulfate (LiDS) instead of SDS. LiDS does not precipitate at low temperatures.
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2016-01-22 11:18:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-22 12:18:05
跑胶时间太久导致的，一般跑胶两个小时左右就可以了

时间短了条带分不开，即使换成6%的胶也效果也不好，而且似乎更容易变形。请问有什么可以解决的方法吗？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2016-01-22 13:52:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
引用回帖:
9楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2016-01-22 14:58:02
应该在50kD~100kD左右。跑胶的时候不加变性剂。同时分离胶中含有1%的羧甲基纤维素，这个会阻碍蛋白移动。...

上下层胶你在配的时候要压胶。使界面平滑，然后可能是样品没有煮好。
赞一下(1人) 回复此楼
生命在于运动
10楼2016-01-22 16:33:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
24楼: Originally posted by sskyy at 2016-01-24 23:19:36
也有可能，加胶之前要加点水水检查是否漏水...

不会漏的，制了好多胶了，老手
赞一下(1人) 回复此楼
29楼2016-01-25 10:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-23 22:43:17
出现过这种情况，但是实在电压太高的情况下出现的。你这个是不是跑太长时间了
赞一下 回复此楼
2楼2016-01-22 10:47:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
跑胶时间太久导致的，一般跑胶两个小时左右就可以了
赞一下 回复此楼
生命在于运动
4楼2016-01-22 12:18:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 反应链 at 2016-01-22 11:18:26
If electrophorsis is carried out at low temperatures, use lithium dodecyle sulfate (LiDS) instead of SDS. LiDS does not precipitate at low temperatures.

学到了，受教
回复此楼
7楼2016-01-22 13:54:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一个不小心就 at 2016-01-22 13:52:27
时间短了条带分不开，即使换成6%的胶也效果也不好，而且似乎更容易变形。请问有什么可以解决的方法吗？...

你的蛋白分子量多大啊？
赞一下 回复此楼
生命在于运动
8楼2016-01-22 14:37:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-22 14:37:28
你的蛋白分子量多大啊？...

应该在50kD~100kD左右。跑胶的时候不加变性剂。同时分离胶中含有1%的羧甲基纤维素，这个会阻碍蛋白移动。
赞一下 回复此楼
9楼2016-01-22 14:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一个不小心就 的主题更新
381/4返回列表1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭