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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白质电泳，SDS-PAGE求指教
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质电泳，SDS-PAGE求指教 已有5人参与

头疼！！求大家指教。
我跑SDS-PAGE的时候胶总是变形，如图所示，蓝色的那条线是溴酚蓝。注意：上样孔有点扭曲，两层胶的分界线不直，这都是跑胶以后造成的。
跑胶条件：60V，跑10h，室温不高于6℃。灌胶的时候充分摇均匀了。

蛋白质电泳，SDS-PAGE求指教
变形凝胶.jpg
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1楼 2016-01-22 10:30:28
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一个不小心就

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-22 14:37:28
你的蛋白分子量多大啊？...

应该在50kD~100kD左右。跑胶的时候不加变性剂。同时分离胶中含有1%的羧甲基纤维素，这个会阻碍蛋白移动。
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9楼2016-01-22 14:58:02
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-23 22:43:17
出现过这种情况，但是实在电压太高的情况下出现的。你这个是不是跑太长时间了
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2楼2016-01-22 10:47:20
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反应链

新虫 (正式写手)
If electrophorsis is carried out at low temperatures, use lithium dodecyle sulfate (LiDS) instead of SDS. LiDS does not precipitate at low temperatures.
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3楼2016-01-22 11:18:26
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫
跑胶时间太久导致的，一般跑胶两个小时左右就可以了
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生命在于运动
4楼2016-01-22 12:18:05
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