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金虫 (初入文坛)

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[交流] 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸

我的蛋白是酵母表达的，因为用处原因不能用核酸酶来处理（有试过核酸酶处理是有去除效果的）。在这之前，也试过肝素柱、疏水柱、HQ、XQ、DETA等各种阴离子柱，以及POROS等一些阳离子柱，，甚至是超滤，效果都不理想。请问大神们，还有什么可以尝试的方法吗？或者可以提供文献一些吗？诚挚感谢！

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1楼 2016-01-04 16:08:28

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wei_198211

新虫 (初入文坛)

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★
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疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话，样品中加硫酸铵后上疏水柱，核酸不挂柱或者结合很弱，盐浓度稍微降一降就洗下来了，而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话，一般核酸与阴离子结合都很强，用0.5M以上的氯化钠才能洗下来，而蛋白通常用0.15M氯化钠就洗下来了。分子筛一般也能去除核酸，要看你的目的蛋白有多大，如果只有几十k的话，核酸先出来，目的蛋白后出来，这样就分开了。