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tbsj666

金虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸

我的蛋白是酵母表达的,因为用处原因不能用核酸酶来处理(有试过核酸酶处理是有去除效果的)。在这之前,也试过肝素柱、疏水柱、HQ、XQ、DETA等各种阴离子柱,以及POROS等一些阳离子柱,,甚至是超滤,效果都不理想。请问大神们,还有什么可以尝试的方法吗?或者可以提供文献一些吗? 诚挚感谢!
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wei_198211

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话,样品中加硫酸铵后上疏水柱,核酸不挂柱或者结合很弱,盐浓度稍微降一降就洗下来了,而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话,一般核酸与阴离子结合都很强,用0.5M以上的氯化钠才能洗下来,而蛋白通常用0.15M氯化钠就洗下来了。分子筛一般也能去除核酸,要看你的目的蛋白有多大,如果只有几十k的话,核酸先出来,目的蛋白后出来,这样就分开了。
10楼2016-01-06 00:14:39
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tbsj666(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-01-04 16:26:23
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3楼2016-01-04 16:47:33
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4楼2016-01-04 16:52:34
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6楼2016-01-04 16:54:44
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7楼2016-01-04 17:11:29
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8楼2016-01-04 17:22:50
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9楼2016-01-04 17:39:24
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