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咪唑对离子交换层析的影响？包涵体蛋白纯化过程中如何检测蛋白浓度？
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在做蛋白纯化的时候，NI柱纯化后进行离子交换层析，在这之间要进行透析或者超滤浓缩，除了降低盐离子浓度之外还会将咪唑除去，请问咪唑对离子交换有影响吗？如果直接进行分子筛或者其他实验的时候，还需将咪唑除去，咪唑对蛋白有什么影响吗？ 纯化包涵体蛋白的时候要用到尿素，没法用nanodrop测量蛋白的浓度，怎么确定洗脱蛋白的浓度以及蛋白是否已经完全从柱上洗脱下来？可溶蛋白用考马斯亮蓝G-250进行检测，包涵体蛋白是否也可以？尿素会影响检测结果吗？ 希望知道的大牛给予解答！谢谢！ |
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2楼2015-07-23 23:48:06