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咪唑对离子交换层析的影响?包涵体蛋白纯化过程中如何检测蛋白浓度?
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在做蛋白纯化的时候,NI柱纯化后进行离子交换层析,在这之间要进行透析或者超滤浓缩,除了降低盐离子浓度之外还会将咪唑除去,请问咪唑对离子交换有影响吗?如果直接进行分子筛或者其他实验的时候,还需将咪唑除去,咪唑对蛋白有什么影响吗? 纯化包涵体蛋白的时候要用到尿素,没法用nanodrop测量蛋白的浓度,怎么确定洗脱蛋白的浓度以及蛋白是否已经完全从柱上洗脱下来?可溶蛋白用考马斯亮蓝G-250进行检测,包涵体蛋白是否也可以?尿素会影响检测结果吗? 希望知道的大牛给予解答!谢谢! |
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