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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸
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hc-material

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议好好优化下你现在已经用的各种层析，层析法应该能分开，慢慢摸索最佳层析条件吧，祝顺利

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11楼2016-01-09 02:49:24
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tbsj666

金虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by wei_198211 at 2016-01-06 00:14:39
疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话，样品中加硫酸铵后上疏水柱，核酸不挂柱或者结合很弱，盐浓度稍微降一降就洗下来了，而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话，一般核酸与阴离子结合都很强，用0.5 ...

谢谢，您说的这些方法都试过的，效果不好。初步判断是核酸和蛋白缠绕导致分不开。请问还有其他可以推荐的吗？
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12楼2016-01-14 18:10:07
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wei_198211

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by tbsj666 at 2016-01-14 18:10:07
谢谢，您说的这些方法都试过的，效果不好。初步判断是核酸和蛋白缠绕导致分不开。请问还有其他可以推荐的吗？...

你的蛋白是周质表达的吗，是不是用超声破的细胞，那样可能胞内的核酸全部跑出来了。你的核酸是去除的很少还是残留超标，一般如果发酵液中核酸太多，纯化部分得用至少三种原理的层析才能去除干净
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13楼2016-01-15 21:46:52
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hc2015

新虫 (小有名气)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 注册商家也只能在广告区发广告，其它区发广告仍属违规 2016-05-05 22:13:26
本帖内容被屏蔽
14楼2016-02-15 11:47:16
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caoqijaiyou


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15楼2016-02-16 08:01:14
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johnlenon40

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
除了过离子交换柱之外，蛋白纯化过程中使用高盐溶液以减少蛋白与核酸的结合
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16楼2016-02-16 15:14:02
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littlebiohit

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的蛋白多大 做离子交换的时候 缓冲液pH是多少？
一般情况下 疏水+离子交换能去除极大量的核酸。
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17楼2016-03-30 11:15:29
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losycve

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by wei_198211 at 2016-01-15 21:46:52
你的蛋白是周质表达的吗，是不是用超声破的细胞，那样可能胞内的核酸全部跑出来了。你的核酸是去除的很少还是残留超标，一般如果发酵液中核酸太多，纯化部分得用至少三种原理的层析才能去除干净...

我们也遇到类似的情况，最终蛋白中残留的核酸含量超标……

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18楼2016-09-24 08:49:38
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149013441

金虫 (小有名气)
点赞！！！！！！！！！！！！！！！！！！！
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努力就会有收获
19楼2017-03-23 11:29:35
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jeneffer

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by tbsj666 at 2016-01-14 18:10:07
谢谢，您说的这些方法都试过的，效果不好。初步判断是核酸和蛋白缠绕导致分不开。请问还有其他可以推荐的吗？...

BIO的CHTII
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20楼2017-05-08 22:38:34
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