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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸
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tbsj666

金虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸

我的蛋白是酵母表达的，因为用处原因不能用核酸酶来处理（有试过核酸酶处理是有去除效果的）。在这之前，也试过肝素柱、疏水柱、HQ、XQ、DETA等各种阴离子柱，以及POROS等一些阳离子柱，，甚至是超滤，效果都不理想。请问大神们，还有什么可以尝试的方法吗？或者可以提供文献一些吗？ 诚挚感谢！
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1楼 2016-01-04 16:08:28
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wei_198211

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话，样品中加硫酸铵后上疏水柱，核酸不挂柱或者结合很弱，盐浓度稍微降一降就洗下来了，而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话，一般核酸与阴离子结合都很强，用0.5M以上的氯化钠才能洗下来，而蛋白通常用0.15M氯化钠就洗下来了。分子筛一般也能去除核酸，要看你的目的蛋白有多大，如果只有几十k的话，核酸先出来，目的蛋白后出来，这样就分开了。
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10楼2016-01-06 00:14:39
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skyish
★
tbsj666(金币+1): 谢谢参与
一

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-01-04 17:22:50
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hc-material

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议好好优化下你现在已经用的各种层析，层析法应该能分开，慢慢摸索最佳层析条件吧，祝顺利

发自小木虫IOS客户端
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11楼2016-01-09 02:49:24
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tbsj666

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wei_198211 at 2016-01-06 00:14:39
疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话，样品中加硫酸铵后上疏水柱，核酸不挂柱或者结合很弱，盐浓度稍微降一降就洗下来了，而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话，一般核酸与阴离子结合都很强，用0.5 ...

谢谢，您说的这些方法都试过的，效果不好。初步判断是核酸和蛋白缠绕导致分不开。请问还有其他可以推荐的吗？
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12楼2016-01-14 18:10:07
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