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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸
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tbsj666

金虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸

我的蛋白是酵母表达的，因为用处原因不能用核酸酶来处理（有试过核酸酶处理是有去除效果的）。在这之前，也试过肝素柱、疏水柱、HQ、XQ、DETA等各种阴离子柱，以及POROS等一些阳离子柱，，甚至是超滤，效果都不理想。请问大神们，还有什么可以尝试的方法吗？或者可以提供文献一些吗？ 诚挚感谢！
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1楼 2016-01-04 16:08:28
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wei_198211

新虫 (初入文坛)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话，样品中加硫酸铵后上疏水柱，核酸不挂柱或者结合很弱，盐浓度稍微降一降就洗下来了，而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话，一般核酸与阴离子结合都很强，用0.5M以上的氯化钠才能洗下来，而蛋白通常用0.15M氯化钠就洗下来了。分子筛一般也能去除核酸，要看你的目的蛋白有多大，如果只有几十k的话，核酸先出来，目的蛋白后出来，这样就分开了。
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10楼2016-01-06 00:14:39
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syhorchid
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tbsj666(金币+1): 谢谢参与
2楼2016-01-04 16:26:23
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liucheng883
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tbsj666(金币+1): 谢谢参与
3楼2016-01-04 16:47:33
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假大空
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tbsj666(金币+1): 谢谢参与
4楼2016-01-04 16:52:34
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chentao
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5楼2016-01-04 16:53:28
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tzynew
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6楼2016-01-04 16:54:44
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jiangchunyong
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7楼2016-01-04 17:11:29
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skyish
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tbsj666(金币+1): 谢谢参与
一

发自小木虫IOS客户端
8楼2016-01-04 17:22:50
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fw_xiao
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9楼2016-01-04 17:39:24
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