24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3512)
>文献求助 (342)
>导师招生 (263)
>虫友互识 (262)
>考博 (140)
>休闲灌水 (96)
>招聘信息布告栏 (83)
>硕博家园 (80)
>博后之家 (73)
>基金申请 (59)
>论文投稿 (56)
>论文道贺祈福 (48)
>考研 (48)
>公派出国 (42)
>找工作 (38)
>教师之家 (33)

返回列表

tbsj666

金虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1069.1
散金: 8
帖子: 20
在线: 8.3小时
虫号: 1979436
注册: 2012-09-06
专业: 蛋白质组学

[交流] 蛋白纯化过程中如何有效去除残留核酸

我的蛋白是酵母表达的，因为用处原因不能用核酸酶来处理（有试过核酸酶处理是有去除效果的）。在这之前，也试过肝素柱、疏水柱、HQ、XQ、DETA等各种阴离子柱，以及POROS等一些阳离子柱，，甚至是超滤，效果都不理想。请问大神们，还有什么可以尝试的方法吗？或者可以提供文献一些吗？诚挚感谢！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

咪唑对离子交换层析的影响？包涵体蛋白纯化过程中如何检测蛋白浓度？已经有1人回复
含油植物籽粒中的蛋白提取及纯化问题已经有0人回复
蛋白纯化过程中出现问题，求助已经有0人回复
求大神，蛋白质纯化过程如何解决降解和沉淀已经有6人回复
新手蛋白分离纯化过程中，询问过程中一些试剂配制及细节问题，望高手，提供帮忙已经有4人回复
照顾宝宝大全请虫友仔细阅读，总有您需要了解的已经有23人回复
【资料】分子生物学常见问题解答已经有30人回复
包涵体在PH10以上才能溶解如何进一步纯化已经有2人回复
【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】已经有178人回复
【资源】液相色谱常见问题及处理方法已经有43人回复
【资源】高效液相色谱仪使用遇到的问题已经有24人回复
【专题】高效液相色谱仪使用遇到的问题已经有36人回复

1楼 2016-01-04 16:08:28

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wei_198211

新虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 16.5
帖子: 8
在线: 3.1小时
虫号: 4336224
注册: 2016-01-05

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

疏水和阴离子都可以有效去除核酸。疏水的话，样品中加硫酸铵后上疏水柱，核酸不挂柱或者结合很弱，盐浓度稍微降一降就洗下来了，而蛋白通常在降低盐浓度时才会下来。阴离子的话，一般核酸与阴离子结合都很强，用0.5M以上的氯化钠才能洗下来，而蛋白通常用0.15M氯化钠就洗下来了。分子筛一般也能去除核酸，要看你的目的蛋白有多大，如果只有几十k的话，核酸先出来，目的蛋白后出来，这样就分开了。