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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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罗淑芬

新虫 (小有名气)

[求助] 关于酶活的计算 已有1人参与

我测的是己糖激酶，想请教下怎么计算酶活的，我的方法如下：
1）100ul酶液+1ml 反应液（50mM Tris-HCl pH8.0 含4mM MgCl2，2.5mM ATP，0.33μM NAD+，1 U葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，1mM 葡萄糖）
2）于37℃，波长340nm下进行吸光值扫描
3）取直线段1min的吸光值变化

以每分钟产生的NADH来计算酶活，我想知道，我怎么计算这个每分钟产生的NADH啊？其实就是怎么计算酶活，没弄明白。
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1楼 2015-11-30 10:32:01
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个要测量标准曲线的，才可以进行对照。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
2楼2015-11-30 10:47:39
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罗淑芬

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sytucom at 2015-11-30 10:47:39
这个要测量标准曲线的，才可以进行对照。

你的意思是说，我用几个浓度的标品也做一个这样的连续扫描，都取1min 的吸光值变化，做成标准曲线，然后再计算？
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3楼2015-11-30 11:46:09
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sytucom

版主 (知名作家)

日光之下，并无新事

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
罗淑芬: 金币+15, 得到求助，谢谢 2015-11-30 13:00:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 罗淑芬 at 2015-11-30 11:46:09
你的意思是说，我用几个浓度的标品也做一个这样的连续扫描，都取1min 的吸光值变化，做成标准曲线，然后再计算？...

楼主果然聪明人，正解。
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已有的事，后必再有，已行的事，后必再行。
4楼2015-11-30 11:48:33
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罗淑芬

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sytucom at 2015-11-30 11:48:33
楼主果然聪明人，正解。...

好的，秒懂，谢谢
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5楼2015-11-30 12:59:21
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1250462609

新虫 (初入文坛)
楼主，能问下你测得什么的材料的己糖激酶么，提取方法是什么，谢谢
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6楼2015-12-25 12:37:21
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风恋邱

铁虫 (正式写手)
你要先做一个NADPH标曲，然后就是，不是以NADH为对照吧，我是以NADPH为对照。先计算出NADPH的量，在算出酶活力与酶比活力
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7楼2016-10-21 17:09:56
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不懂要学习
引用回帖:
1楼: Originally posted by 罗淑芬 at 2015-11-30 10:32:01
我测的是己糖激酶，想请教下怎么计算酶活的，我的方法如下：
1）100ul酶液+1ml 反应液（50mM Tris-HCl pH8.0 含4mM MgCl2，2.5mM ATP，0.33μM NAD+，1 U葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，1mM 葡萄糖）
2）于37℃，波长340n ...

，

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8楼2018-07-24 08:17:55
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