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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于福林酚法测酱油曲中酸性蛋白酶的问题
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zbbrian

木虫 (初入文坛)

[求助] 关于福林酚法测酱油曲中酸性蛋白酶的问题 已有1人参与

本人一直使用国标介绍的福林酚法测酱油曲中的酸性蛋白酶。现在遇到的问题是每样3组平行，另有一管是空白，按照国标的方法，空白应该是加TCA使粗酶液失活，再加入2%酪蛋白。过程中对粗酶液加入TCA并未有白色沉淀产生，溶液澄清，不知各位是如何确定粗酶液的失活状态，而终止反应时加入TCA则 会有白色沉淀产生。
最后是在660nm下测吸光值，空白组的结果与样品组的差别不大（例如0.183（样）与0.156（空白）这种水平），如再按照国标扣去空白，计算的酶活就会的不正常。
因此这个问题困扰了我很久，缓冲液及试剂是当天配的，温度和时间也都按照要求控制，只有空白组的数据让我一直不知如何处理，希望大家给我指点~~
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是的，我像爱一条河流一样爱你，永别了
1楼 2014-12-22 10:06:40
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紫煜紫煜紫煜

新虫 (初入文坛)
楼主你的问题有答案了吗，我现在测的结果，也是空白和处理组，差别很小，0.03左右，这是什么原因？？请告知！谢谢！！
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2楼2015-03-17 15:32:39
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zbbrian

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫煜紫煜紫煜 at 2015-03-17 15:32:39
楼主你的问题有答案了吗，我现在测的结果，也是空白和处理组，差别很小，0.03左右，这是什么原因？？请告知！谢谢！！

也没有办法，只能暂时先这样记录着啊……
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是的，我像爱一条河流一样爱你，永别了
3楼2015-09-14 10:37:45
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科研菜鸟111

金虫 (正式写手)
楼主QQ多少，我有问题请教你，关于酶活测定的
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4楼2015-09-18 10:26:44
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lixuhui319

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zbbrian: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-18 14:52:31
建议采用沸水浴使酶失活，然后加TCA沉淀蛋白，空白采用同样方法使酶失活，效果好些。

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5楼2015-09-18 11:48:37
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