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zbbrian管理员
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[求助]
关于福林酚法测酱油曲中酸性蛋白酶的问题 已有1人参与
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本人一直使用国标介绍的福林酚法测酱油曲中的酸性蛋白酶。现在遇到的问题是每样3组平行，另有一管是空白，按照国标的方法，空白应该是加TCA使粗酶液失活，再加入2%酪蛋白。过程中对粗酶液加入TCA并未有白色沉淀产生，溶液澄清，不知各位是如何确定粗酶液的失活状态，而终止反应时加入TCA则 会有白色沉淀产生。 最后是在660nm下测吸光值，空白组的结果与样品组的差别不大（例如0.183（样）与0.156（空白）这种水平），如再按照国标扣去空白，计算的酶活就会的不正常。 因此这个问题困扰了我很久，缓冲液及试剂是当天配的，温度和时间也都按照要求控制，只有空白组的数据让我一直不知如何处理，希望大家给我指点~~  |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
zbbrian: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-18 14:52:31
zbbrian: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-09-18 14:52:31
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建议采用沸水浴使酶失活，然后加TCA沉淀蛋白，空白采用同样方法使酶失活，效果好些。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2015-09-18 11:48:37
2楼2015-03-17 15:32:39
zbbrian
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科研菜鸟111
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4楼2015-09-18 10:26:44
