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星星彩虹

金虫 (小有名气)

[求助] 关于底物Km值计算的问题

我想问下,在利用双倒数方程进行底物Km和Vmax计算时,对底物浓度有要求么?
我看在测定酶活时,最好将底物浓度设置成Km的5倍以上,那么双倒数方程计算的时候需要把浓度加这么大么?
我现在计算时,使用的浓度和估计的Km差不多,但是出现,Y轴截距是负数的情况。。。做了几次都是这样,可能是什么原因啊。。。
在网上查到说不用倒数,直接用V和S求解,用Hill方程?有这样用的么?哪种比较准确一点啊。
对求解Km还不是很熟,求大神指导,万分感谢。
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