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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 米氏常数测定方面的疑问。。。谢谢大家了。。。
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zhenhans

银虫 (小有名气)

[交流] 米氏常数测定方面的疑问。。。谢谢大家了。。。 已有5人参与

酶最适底物浓度考察：在最适温度和pH下，底物浓度分别为1g/100mL、5g/100mL、10g/100mL、15g/100mL、20g/100mL
    酶的米氏常数Km：一定量的酶液，不同质量浓度底物，于最适T、pH下，测他们水解底物的反应初速度。双倒数法作图并进行计算。
  我想问下，这两个实验是同一个么？？？？
  谢谢大家了。。。
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1楼 2011-08-24 11:59:02
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xilababy

木虫 (小有名气)

圣斗士
★
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不懂额 我们都只测米氏常数的
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加油文章毕业偶也
2楼2011-08-24 16:28:18
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zhenhans

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xilababy at 2011-08-24 16:28:18:
不懂额 我们都只测米氏常数的

那你看，能用上面的测出来不？？
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3楼2011-08-25 11:15:22
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小木头？

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
应该是有区别，测米氏常数看的是初速度，而上边的不一定是初速度。
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4楼2011-08-25 16:26:06
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zhenhans

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小木头？ at 2011-08-25 16:26:06:
应该是有区别，测米氏常数看的是初速度，而上边的不一定是初速度。

也是酶与底物混合后，反应二十分钟测定反应产物呢。。再换算成反应的初速度。。。
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5楼2011-08-27 09:42:41
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小木头？

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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adslye(金币+2): 感谢交流·祝顺利！ 2011-08-28 14:01:16
怎么说呢，测最适底物浓度应该让反应尽量完全，不光是看速度，而测米氏常数看的是初速度，但两个过程差不多，貌似初速度不能换算得到吧
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6楼2011-08-28 10:21:16
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DK1024

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是的啊  就是用不同浓度的底物来测定米氏常数的啊  
需要配制不同浓度的底物液体 然后在相同的间隔时间下 加入提前保温的酶液 最后用指示剂滴定  单纯测时间的话 不太准 误差极大 所以就用相同的时间间隔 比如说每隔2分钟什么的加入等量的酶液 最后用消耗的指示剂的量来表示时间
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记忆像是掌心里的水，不论你摊开还是紧握，终究还是会从指缝中一滴一滴流淌干净。
7楼2011-09-01 22:09:46
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popmouse

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
采用底物水解10%时的速率，底物浓度>>酶浓度，大概吧
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8楼2011-09-03 16:44:29
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爱绿枫雪

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by DK1024 at 2011-09-01 22:09:46
是的啊  就是用不同浓度的底物来测定米氏常数的啊  
需要配制不同浓度的底物液体 然后在相同的间隔时间下 加入提前保温的酶液 最后用指示剂滴定  单纯测时间的话 不太准 误差极大 所以就用相同的时间间隔 比如说每 ...

可是加入多少酶量呢？
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9楼2019-12-17 15:47:43
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