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lishan130269

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白电泳后考马斯亮蓝染色怎么看不到条带 已有5人参与

蛋白样品SDS-PAGE后用考马斯亮蓝染色两个小时后加洗脱液洗,两个小时后观察就没条带了,洗脱液为水:甲醇:乙酸=45:45:10,洗脱液应该没问题,还是说染色时就根本没条带?
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syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
脱色液的水:甲醇:乙酸=8:1:1;另外R250染色可以煮沸10min染色,脱色一般煮沸15min就可以了,你再试试!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2015-10-19 08:37:28
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lishan130269

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by syhzlsd at 2015-10-19 08:37:28
脱色液的水:甲醇:乙酸=8:1:1;另外R250染色可以煮沸10min染色,脱色一般煮沸15min就可以了,你再试试!

你染色液配方是啥
10楼2015-10-22 19:36:15
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普通回帖

zzp40

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
也有可能是该换新鲜的染色液了,你的染色液是回收反复用的吗
3楼2015-10-19 10:57:51
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2015-10-21 12:05:47
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

没染上的可能性比较大,因为脱色把蛋白的颜色脱掉了,那还做个鬼啊。染色液的问题可能性比较大。重新配新的缓冲液。祝顺利。
5楼2015-10-22 09:26:03
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厚德求是

木虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

脱色过程有没有守着?你在脱的过程中有看到任何条带吗?Marker在不在?按理说不会那么轻易脱的啥都没有,染色剂是不是不好了。

发自小木虫IOS客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2015-10-22 10:13:42
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lishan130269

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by syhzlsd at 2015-10-19 08:37:28
脱色液的水:甲醇:乙酸=8:1:1;另外R250染色可以煮沸10min染色,脱色一般煮沸15min就可以了,你再试试!

煮沸染色?我试试,微沸吗
7楼2015-10-22 19:31:45
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lishan130269

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 穿白大褂约会 at 2015-10-21 12:05:47
你中间观察过吗?是不是脱色时间长了,要是煮沸脱色,5min就可以看了;建议你点样时点上对照,有问题也好分析。

好的谢谢
8楼2015-10-22 19:33:17
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lishan130269

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 厚德求是 at 2015-10-22 10:13:42
脱色过程有没有守着?你在脱的过程中有看到任何条带吗?Marker在不在?按理说不会那么轻易脱的啥都没有,染色剂是不是不好了。

MARKER在,你们平常看到的条带颜色很深吗?还是我看的方法不对,染色液暑假配的啊,没有回收过
9楼2015-10-22 19:35:12
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