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xuru560

金虫 (正式写手)

达人

[求助] 蛋白质电泳

各位虫友，我最近在做SDS-PAGE电泳时候，发现用考马斯亮蓝染色，并脱色后的蛋白条带呈现红色，请大家帮我分析一下原因，谢谢！
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坚持+加油
1楼 2013-11-01 10:16:56
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是你的考染试剂里面混别的东西了？所有试剂都是新的吗？还是用的回收的染色液？你配方是什么样的？脱色液是水还是别的什么？
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2楼2013-11-01 10:36:51
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白条带呈现红色，我觉得有可能是1.配制胶的试剂污染了；2.考马斯亮蓝溶液出问题了。脱色液其实是脱去胶中无蛋白区域染上的蓝色，所以你这个问题应该和脱色液没关系。
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3楼2013-11-01 11:07:04
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Xu总，考马斯亮蓝有两种，G-250和R-250，一个染出来是青色偏蓝的那种，一个染出来是紫红色的，我记得R-250好像染出来是红的，你再看看是不是换了试剂。
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4楼2013-11-01 14:41:39
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huizhengliu

木虫 (小有名气)
R250染出来的是蓝色，偏紫的那种。G250染出来的也是蓝色。还真没遇到过你说的偏红。
我R250的配方：先配1% R250，1g R250溶到100ml 无水乙醇
染色液：水：甲醇：冰醋酸=5:4:1，在1L染色液里加10ml 1% R250就可以，有条件的话最好过滤一下，染完后自来水脱色就可以。
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5楼2013-11-04 09:24:13
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四人行

新虫 (初入文坛)
各位大虾！帮帮忙！我也在做这个，我植物提取液加入丙酮后，沉淀不是白色的，和以前做的时候不一样，会不会提取出了问题？
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6楼2013-11-07 13:35:33
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