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xuru560

金虫 (正式写手)

达人

[求助] 蛋白质电泳

各位虫友,我最近在做SDS-PAGE电泳时候,发现用考马斯亮蓝染色,并脱色后的蛋白条带呈现红色,请大家帮我分析一下原因,谢谢!
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坚持+加油
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Xu总,考马斯亮蓝有两种,G-250和R-250,一个染出来是青色偏蓝的那种,一个染出来是紫红色的,我记得R-250好像染出来是红的,你再看看是不是换了试剂。
4楼2013-11-01 14:41:39
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是你的考染试剂里面混别的东西了?所有试剂都是新的吗?还是用的回收的染色液?你配方是什么样的?脱色液是水还是别的什么?
2楼2013-11-01 10:36:51
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白条带呈现红色,我觉得有可能是1.配制胶的试剂污染了;2.考马斯亮蓝溶液出问题了。脱色液其实是脱去胶中无蛋白区域染上的蓝色,所以你这个问题应该和脱色液没关系。
3楼2013-11-01 11:07:04
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huizhengliu

木虫 (小有名气)

R250染出来的是蓝色,偏紫的那种。G250染出来的也是蓝色。还真没遇到过你说的偏红。
我R250的配方:先配1% R250,1g R250溶到100ml 无水乙醇
染色液:水:甲醇:冰醋酸=5:4:1,在1L染色液里加10ml 1% R250就可以,有条件的话最好过滤一下,染完后自来水脱色就可以。
5楼2013-11-04 09:24:13
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