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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白电泳后考马斯亮蓝染色怎么看不到条带
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lishan130269

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白电泳后考马斯亮蓝染色怎么看不到条带 已有5人参与

蛋白样品SDS-PAGE后用考马斯亮蓝染色两个小时后加洗脱液洗，两个小时后观察就没条带了，洗脱液为水：甲醇：乙酸=45：45:10，洗脱液应该没问题，还是说染色时就根本没条带？
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1楼 2015-10-17 18:41:18
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
脱色液的水：甲醇：乙酸=8:1:1；另外R250染色可以煮沸10min染色，脱色一般煮沸15min就可以了，你再试试！
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lishan130269
2楼2015-10-19 08:37:28
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lishan130269

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by syhzlsd at 2015-10-19 08:37:28
脱色液的水：甲醇：乙酸=8:1:1；另外R250染色可以煮沸10min染色，脱色一般煮沸15min就可以了，你再试试！

你染色液配方是啥
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10楼2015-10-22 19:36:15
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普通回帖

zzp40

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
也有可能是该换新鲜的染色液了，你的染色液是回收反复用的吗
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3楼2015-10-19 10:57:51
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

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lishan130269
4楼2015-10-21 12:05:47
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

没染上的可能性比较大，因为脱色把蛋白的颜色脱掉了，那还做个鬼啊。染色液的问题可能性比较大。重新配新的缓冲液。祝顺利。
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5楼2015-10-22 09:26:03
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厚德求是

木虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖

脱色过程有没有守着？你在脱的过程中有看到任何条带吗？Marker在不在？按理说不会那么轻易脱的啥都没有，染色剂是不是不好了。

发自小木虫IOS客户端
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lishan130269
6楼2015-10-22 10:13:42
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lishan130269

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by syhzlsd at 2015-10-19 08:37:28
脱色液的水：甲醇：乙酸=8:1:1；另外R250染色可以煮沸10min染色，脱色一般煮沸15min就可以了，你再试试！

煮沸染色？我试试，微沸吗
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7楼2015-10-22 19:31:45
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lishan130269

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 穿白大褂约会 at 2015-10-21 12:05:47
你中间观察过吗？是不是脱色时间长了，要是煮沸脱色，5min就可以看了；建议你点样时点上对照，有问题也好分析。

好的谢谢
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8楼2015-10-22 19:33:17
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lishan130269

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 厚德求是 at 2015-10-22 10:13:42
脱色过程有没有守着？你在脱的过程中有看到任何条带吗？Marker在不在？按理说不会那么轻易脱的啥都没有，染色剂是不是不好了。

MARKER在，你们平常看到的条带颜色很深吗？还是我看的方法不对，染色液暑假配的啊，没有回收过
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9楼2015-10-22 19:35:12
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