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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 急！！高效液相色谱峰出峰时间变动大
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563307607

铜虫 (正式写手)

[求助] 急！！高效液相色谱峰出峰时间变动大 已有7人参与

最近用高效液相走样，发现同一样品在同一柱子、相同流动相、同一洗脱条件下出峰时间偏差较大，排除了流动相的原因，仪器换了一台也是一样的。通过调节柱温使压力与之前一致，但是出峰时间还是不行，相差3~5min，请问有谁知道这是什么原因？O(∩_∩)O谢谢！！
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1楼 2015-10-07 21:34:04
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
563307607: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-10-08 09:02:30
楼主，应该是色谱柱的问题，是不是你流动相的ph环境或者缓冲盐、离子抑制剂等比较极端，造成了色谱柱的损伤呢？pH值最好在2.5-7之间比较好。
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2楼2015-10-08 08:45:05
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563307607

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2015-10-08 08:45:05
楼主，应该是色谱柱的问题，是不是你流动相的ph环境或者缓冲盐、离子抑制剂等比较极端，造成了色谱柱的损伤呢？pH值最好在2.5-7之间比较好。

谢谢！应该是。我用的0.4%的乙酸
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3楼2015-10-08 09:01:54
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奋斗青年

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
563307607: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-10-09 08:02:37
引用回帖:
3楼: Originally posted by 563307607 at 2015-10-08 09:01:54
谢谢！应该是。我用的0.4%的乙酸...

用了酸水的话，就会这样的，我也做过，没加酸出峰时间17左右，加酸就到20了

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4楼2015-10-08 10:28:37
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 563307607 at 2015-10-08 09:01:54
谢谢！应该是。我用的0.4%的乙酸...

楼主，你要测一下流动相的ph值喔，这个0.4%的乙酸，确实有点高了，0.1-0.2%的效果不好？
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5楼2015-10-09 08:47:04
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476054377

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我都是用0.1%的甲酸
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6楼2015-10-09 12:30:18
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fhelene

新虫 (小有名气)
是同一天的还是不同天的？
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7楼2015-10-10 10:30:30
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563307607

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by fhelene at 2015-10-10 10:30:30
是同一天的还是不同天的？

不同天的，问题已解决，谢谢
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8楼2015-10-11 09:52:01
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1436367382

金虫 (正式写手)
柱子

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9楼2015-10-11 09:53:28
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新新纳米

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by 563307607 at 2015-10-07 21:34:04
最近用高效液相走样，发现同一样品在同一柱子、相同流动相、同一洗脱条件下出峰时间偏差较大，排除了流动相的原因，仪器换了一台也是一样的。通过调节柱温使压力与之前一致，但是出峰时间还是不行，相差3~5min，请问 ...

你检查下是不是所有的峰都整体往后延迟了

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10楼2015-10-11 13:16:07
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