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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 反相高效液相C18柱检测肽，溶剂峰一定在最前边出现么，急！！在线等
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yuying.sw

新虫 (初入文坛)

[求助] 反相高效液相C18柱检测肽，溶剂峰一定在最前边出现么，急！！在线等

各位好，我是在做一种磷酸肽的检测，流动相是水（0.1%TFA）和乙腈（0.1%TFA）,C18色谱柱，肽是直接溶解到水里的，比较磷酸肽的谱图和纯水的谱图之后发现，纯水在4min出峰，而磷酸肽的谱图在3min和4min出峰，4min出的峰和纯水的峰是一样的，心里有很大的疑问，一般溶剂峰不是在前边出么？有在样品后边出的可能么？？？着急呀，拜托了~~~~
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1楼 2013-03-12 15:50:51
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
溶剂峰不一定在最前面出，要看溶剂的极性的，比如你用水溶解样品，如果你的样品的极性比水大就在水前面出
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2楼2013-03-12 16:03:55
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yuying.sw

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liu2011 at 2013-03-12 16:03:55
溶剂峰不一定在最前面出，要看溶剂的极性的，比如你用水溶解样品，如果你的样品的极性比水大就在水前面出

多谢您的回复，那我查一下，磷酸肽和水哪个极性比较大吧
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3楼2013-03-12 16:12:48
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
4min的峰应该有倒峰同时存在吧，是干扰峰，不一定是水峰。
4min的峰不是纯水峰，是磷酸的峰。因竞争，TFA取代了肽上的磷酸，使磷酸游离了。
建议流动相中添加10mM己烷磺酸钠，pH3.0左右。可以使保留延长。
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4楼2013-03-12 17:07:44
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