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yuying.sw

新虫 (初入文坛)

[求助] 反相高效液相C18柱检测肽,溶剂峰一定在最前边出现么,急!!在线等

各位好,我是在做一种磷酸肽的检测,流动相是水(0.1%TFA)和乙腈(0.1%TFA),C18色谱柱,肽是直接溶解到水里的,比较磷酸肽的谱图和纯水的谱图之后发现,纯水在4min出峰,而磷酸肽的谱图在3min和4min出峰,4min出的峰和纯水的峰是一样的,心里有很大的疑问,一般溶剂峰不是在前边出么?有在样品后边出的可能么???着急呀,拜托了~~~~
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yuying.sw

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liu2011 at 2013-03-12 16:03:55
溶剂峰不一定在最前面出,要看溶剂的极性的,比如你用水溶解样品,如果你的样品的极性比水大就在水前面出

多谢您的回复,那我查一下,磷酸肽和水哪个极性比较大吧
3楼2013-03-12 16:12:48
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
溶剂峰不一定在最前面出,要看溶剂的极性的,比如你用水溶解样品,如果你的样品的极性比水大就在水前面出
2楼2013-03-12 16:03:55
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
4min的峰应该有倒峰同时存在吧,是干扰峰,不一定是水峰。
4min的峰不是纯水峰,是磷酸的峰。因竞争,TFA取代了肽上的磷酸,使磷酸游离了。
建议流动相中添加10mM己烷磺酸钠,pH3.0左右。可以使保留延长。
4楼2013-03-12 17:07:44
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