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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 急！！！高效液相色谱 双峰，拖尾，求解决！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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21007026

铁虫 (小有名气)

[求助] 急！！！高效液相色谱 双峰，拖尾，求解决！ 已有25人参与

之前跑标准品，峰型很好，但最近液相峰型突然不好了，总是出现双峰或者拖尾。如下图所示
现在怀疑是柱子脏了，我用甲醇-水=1:9跑了15小时，没什么效果。请教有过此经验的人，给一下建议。

急！！！高效液相色谱 双峰，拖尾，求解决！
之前的标准品.png


急！！！高效液相色谱 双峰，拖尾，求解决！-1
之后的出现双峰的标准品.png
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1楼 2014-07-24 15:03:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

sepax-Dr.G

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-08-01 08:25:03
试下10%乙腈水（是C18柱子吧？）低流速反冲一下，连标准品的峰都成那样估计是柱子脏了。一定要低流速反冲（最好的办法是联系售后，这明显是柱子问题）
赞一下(2人) 回复此楼
我宁愿被雨打风吹日晒，被大漠风沙伤害，把心暴露在阳光下对你表白
9楼2014-07-24 17:20:47
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耿小熙爱学习

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+2 2014-08-05 15:56:36
峰坍塌了，反冲下试着用吧，如果可以用估计还能顶一段时间。
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我来，我在，我统治。
27楼2014-07-25 17:05:37
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野狗般战斗着

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+2, 没有新柱子可换了。。。 2014-08-05 15:56:21
换个柱子试试，检查下流动相的ph值
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4楼2014-07-24 16:27:51
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happy1991

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+2, ★有帮助 2014-08-01 08:26:44
可能是样品讲解，可以配两个不同浓度的标准品进样看一下峰形
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-07-24 17:10:38
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

引用回帖:
16楼: Originally posted by 野狗般战斗着 at 2014-07-25 09:21:58
流动相如果没有盐的话就用100%的甲醇冲30min，然后用100%的乙腈冲30min，不过如果污染的话，只靠冲柱子是解决不了的
最好还是拆柱子修...

柱子绝对不能随便拆的，柱子拆了之后再重新装的话，一个担心拆的过程中，导致柱头不平整，导致峰形更差而没办法修复了，另外一个是重新装上之后，怕柱头填料会有松散，导致柱头更容易塌陷，
赞一下(1人) 回复此楼
人生若只如初见...
18楼2014-07-25 09:28:36
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刘东磊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是保护住有问题了，可以卸下来直接进样，观察是否有改变。
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24楼2014-07-25 11:22:35
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azhang_05

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+2 2014-08-05 15:59:34
柱子出问题的可能最大，反冲一下吧，会暂时解决，但用不了多久还会出现这种情况，抓紧订个新柱子备用。
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25楼2014-07-25 11:30:05
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晓风眷月

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也遇到过这样的情况，排除变质的因素，就我的经验来说，你第一个峰型很好，很可能是因为浓度比较大，峰比较高，两个峰没分开，楼主可以现在在用这么大的浓度跑一遍试试，是否还是很好地单峰。如果不是，那就该看看前后两次的压力变化大不大，很多时候前后两次出现不同结果都是因为柱子或者管路堵塞导致压力不一样，就会产生两种截然不同的结果。
希望对你有所帮助
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感性大于理性的理科人
35楼2014-07-28 09:43:13
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普通回帖

e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
21007026: 金币+2 2014-08-01 08:27:02
有变质的迹象哦，排除下看看
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悲催的研发！
2楼2014-07-24 15:08:15
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nwzf00

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品降解了吧！是新样品吗？
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3楼2014-07-24 15:38:34
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21007026

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by e_liang369 at 2014-07-24 15:08:15
有变质的迹象哦，排除下看看

不是变质，因为所有的标准品都分叉，都有双峰。而且这两个标准品跑的时间相差不到2周，都是同一个。
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6楼2014-07-24 17:19:21
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21007026

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by nwzf00 at 2014-07-24 15:38:34
样品降解了吧！是新样品吗？

同一个样品，检测时间相差8天。
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7楼2014-07-24 17:19:50
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21007026

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 野狗般战斗着 at 2014-07-24 16:27:51
换个柱子试试，检查下流动相的ph值

备用柱子没有了，就想恢复一下柱子。知道怎么调整吗？
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8楼2014-07-24 17:20:43
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21007026

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by happy1991 at 2014-07-24 17:10:38
可能是样品讲解，可以配两个不同浓度的标准品进样看一下峰形

我跑的就是标准曲线，浓度不同，但都有双峰。。。
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10楼2014-07-24 17:21:27
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