24小时热门版块排行榜    

查看: 1150  |  回复: 4

keyth

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请大家看看这个SDS-PAGE的胶浓度是否合适? 已有2人参与

样品是一种植物蛋白,分离胶浓度为12%,最右边为低分子量marker,分子量从15kDa-99kDa。左边都是样品。前沿一排的颜色好蓝,我怀疑不是我的样品杨塞,而是溴酚蓝的颜色。恳请各位老师帮我鉴定一下是否是胶浓度不合适或是其他原因
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
keyth: 金币+25, 有帮助 2015-09-09 15:28:33
keyth: 金币+25, 有帮助 2015-09-09 15:29:41
没看到图
据描述应该不是胶的问题。
染色液,海有脱色是否彻底。
请参考:电泳相关溶液的配置:

1、30%丙稀酰胺混合溶液(100ml):称取29g丙稀酰胺和1g bis丙稀酰胺,用水溶解定容到100ml,过滤,4摄氏度保存一个月。

2、 5×SDS电极缓冲液:称取Tris base15.1g,甘氨酸94.g,SDS 5.g加dH2O定容至1000ml。

3、2×样品缓冲液(10ml):甘油2ml,溴酚蓝0.0202g,1MTris·Cl(pH6.8)1ml巯基乙醇0.14ml,10%SDS 4ml。

4、染色液的配制(1000ml):

  用量筒分别量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸;在电子天平上称取0.125%考马斯亮蓝R250 1.25g,再将其一一加到1000ml锥形瓶中,用蒸馏水加以补足至1000ml。加入的先后顺序为:考马斯亮蓝R250,甲醇或者乙醇,蒸馏水,乙酸。充分混匀后进行过滤,收集滤液备用。当过滤速度变慢时要更换滤纸,快速过滤完,不可隔夜以免影响染色效果。

5、脱色液(1000ml):

   用量筒分别量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸、670ml蒸馏水加入烧杯中,待溶液混和均匀后加入盛脱色液的广口瓶;备用。
2楼2015-09-07 10:50:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keyth

铜虫 (初入文坛)

http://pan.baidu.com/s/1hqk2ndE
图片一直上传不了最后帖子都不能编辑了。。。电泳图片上传到网盘里了,麻烦您点击链接下载一下吧。。。
3楼2015-09-07 11:30:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不是胶的问题,应该是电泳缓冲液的问题,也有可能是跑电泳时条件不对
医学&统计学
4楼2015-09-08 09:40:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keyth

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 董博士 at 2015-09-08 09:40:26
不是胶的问题,应该是电泳缓冲液的问题,也有可能是跑电泳时条件不对

电泳缓冲液是按照14.4g甘氨酸,3g Tris,1g SDS定容至1000mL这样配制的。电泳条件是浓缩胶恒压100V,分离胶120V,起始电流50mA左右,电泳结束后大概会降到30mA。请问这样有什么问题吗?
5楼2015-09-08 16:57:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 keyth 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 085601求调剂 +3 Du.11 2026-03-16 3/150 2026-03-16 20:42 by 无际的草原
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy! 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见