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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 糖基化蛋白纯化问题
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david0308

木虫 (正式写手)

[求助] 糖基化蛋白纯化问题 已有1人参与

我最近准备用镍柱纯化一个多糖基化的蛋白，但是在洗脱的过程中发现糖基化降解的很厉害，请问有什么办法避免吗？请各位大侠帮忙！
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哈哈
1楼 2015-09-04 13:54:25
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
david0308: 金币+100, ★★★很有帮助 2015-09-05 11:16:15
可以尝试在样品中加Triton X-100，焦磷酸钠(Na4P2O7·10H2O),β-磷酸甘油，EDTA，DTT.亮抑酶肽等抑制剂，防止蛋白降解。加入1%左右，可单独加入尝试，也可以复合加入尝试。在从层析的所有溶液中都加。可以试试，祝顺利。
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2楼2015-09-04 20:20:41
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david0308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-04 20:20:41
可以尝试在样品中加Triton X-100，焦磷酸钠(Na4P2O7·10H2O),β-磷酸甘油，EDTA，DTT.亮抑酶肽等抑制剂，防止蛋白降解。加入1%左右，可单独加入尝试，也可以复合加入尝试。在从层析的所有溶液中都加。可以试试，祝顺 ...

我觉得糖基化降解的主要原因是被还原，会不会是最后一步谷胱甘肽加的量过多导致的呢？
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哈哈
3楼2015-09-05 11:17:30
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hc-material

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by david0308 at 2015-09-05 11:17:30
我觉得糖基化降解的主要原因是被还原，会不会是最后一步谷胱甘肽加的量过多导致的呢？...

用镍柱纯化，加谷胱甘肽干啥。这个具体不知道，你可以尝试少加点试试。祝顺利。
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4楼2015-09-05 12:06:17
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david0308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-05 12:06:17
用镍柱纯化，加谷胱甘肽干啥。这个具体不知道，你可以尝试少加点试试。祝顺利。...

谢谢啦！
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哈哈
5楼2015-09-05 13:02:55
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2015-09-25 17:28:01
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