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kika8014

金虫 (正式写手)

[求助] 粘多糖发酵,产物蛋白含量超标是什么原因造成的呢? 已有1人参与

各位虫友大神,做透明质酸发酵,一种粘多糖,培养基成分包括酵母浸粉,蛋白胨,无机盐等,发酵完成后,用乙醇沉淀提取纯化,现在有个问题,使用有的厂家浸粉,成品透明质酸含量超过0.1%,超过国标,而有的厂家浸粉就没有这个问题。浸粉添加量也就0.5%左右,后面还有乙醇沉淀除去蛋白,影响有这么大吗?

考虑了一下,是不是与浸粉肽段分布有关,可能一定分子量的肽段醇沉淀除不干净,或者与产物结合了??   还有另外的可能就是类似于核酸蛋白类的蛋白复合体??

请各位专家给点意见呗,想研究一下
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stephen1102

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

发酵过程:培养基成分会影响HA的蛋白残留的,发酵过程的培养基最好要保持相同厂家的,如果有条件建立个物料放行标准(自己内部制定);纯化过程:0.1%的标准其实很好实现,依靠乙醇沉淀可以去除绝大部分蛋白,但不能完全去除,可以尝试多步醇沉,或者增加纯化步骤(超滤,活性炭脱色、树脂吸附等)均能有效降低蛋白含量;分析部分:对于蛋白含量<0.1%,一般分析方法稳定性不好,不知道你们是采用什么检测方法的,所以存在有些批次合格有些批次不合格,不妨验证下你们分析方法。
戒骄戒躁,做好自己
2楼2015-09-28 10:40:10
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