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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 琼脂糖凝胶电泳问题
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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳问题 已有5人参与

电泳完毕后,取出凝胶,用含有0.5 ug/ml的溴化乙锭1×TAE溶液染色约20 min,再用清水漂洗10 min.
这一步具体怎么操作？？直接配制EB缓冲液，然后在里面浸泡吗？可是并没有看到条带产生。。求助
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1楼 2015-08-04 22:10:00
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ged888

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-04 22:34:29
泡EB10分钟就够了，洗10秒也够了
然后需要在凝胶成像系统里看
肉眼肯定看不到
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2楼2015-08-04 22:21:02
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guodonwang

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们是做琼脂糖胶时候加EB，直接加到胶里面，电泳15分钟（视片段大小及胶浓度而定），然后就照胶（UV下），就可以看出了，一班点样3-5ul,就行了。电泳后EB染色，容易导致DNA的扩散，照胶时，条带不清晰。
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格物致知
3楼2015-08-05 00:55:05
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673643401

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们也是配胶时直接把EB加到胶里面，胶里面加入一点EB就可以了。
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4楼2015-08-05 08:57:41
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扬名声

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
同上，把少量EB加到胶凝固前的液体里面
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5楼2015-08-05 09:15:37
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蓝洋飘雪

木虫 (小有名气)
我们也是配胶时直接把EB加到胶里（EB在60-70℃有挥发毒性），跑完电泳后必须进行照胶才能看到有没有条带，肉眼是看不到的。
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人生如茶，不会苦一辈子，但会苦一阵子！
6楼2015-08-05 13:20:06
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dingyi3363

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做的时候是先加EB然后再跑胶的
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7楼2015-08-05 13:41:17
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狮子小恶

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 673643401 at 2015-08-05 08:57:41
我们也是配胶时直接把EB加到胶里面，胶里面加入一点EB就可以了。

你好，那是一般EB加多少啊？比如我配的是30mL的胶，应该加多少EB？谢谢啦

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8楼2015-10-20 09:11:41
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