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sinky熹

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[求助] 琼脂糖凝胶电泳严重拖尾已有2人参与

做的PCR类似巢式PCR，要二轮PCR，之后跑胶结果如图，拖尾的很严重，已经排除是电泳缓冲液和胶的问题了。重复的是以前的实验，但是东西不是一个批次的，模板用的是大半年前的质粒。希望高手指点。。。

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1楼 2014-05-01 15:03:03

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朱多龙

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【答案】应助回帖

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sinky熹: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-01 15:56:08
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-01 20:43:33

这个现象主要是由于质粒的问题引起的。作为模板的质粒及基因组，时间久了就会出现这种拖尾的现象。DNA片段时间久了会出现一些随机的断裂，就会降低PCR产物的质量。所以还是换一批新的模板，我也会经常遇到这种现象。

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2楼2014-05-01 15:23:08

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sinky熹

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 朱多龙 at 2014-05-01 15:23:08
这个现象主要是由于质粒的问题引起的。作为模板的质粒及基因组，时间久了就会出现这种拖尾的现象。DNA片段时间久了会出现一些随机的断裂，就会降低PCR产物的质量。所以还是换一批新的模板，我也会经常遇到这种现象。

质粒已经摇上了，准备重新提。但是一轮PCR时采用的模板为质粒，第二轮PCR时用的是第一轮PCR的产物，第一轮电泳结果图却很好，会不会还有其他问题？

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3楼2014-05-01 15:41:43

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