| 查看: 1698 | 回复: 26 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
原核表达方面的问题，求各路大神不吝赐教 已有7人参与
|
||
|
最近在做原核表达，现在已经将目的基因与 pet28a连接好并转入了top10，测序正确后提取了质粒，下一步准备将质粒转入bl21。 问题就来了，每次做转化都不成功，板子上长满了克隆，可是挑12个没有一个是阳性的。::>_<:: 针对这个问题，我也分析了原因，1是感受态（我后来又用了同学的感受态，这批感受态他之前用过，没问题），2是板子的抗生素（我用这批板子做过其他实验，也没问题）3是质粒（我又把提出来的这个质粒送去了测序，也没问题）4实验操作（转化我做过很多次，而且这个转化实验我也重复了几次，每次都没阳性克隆） 问题就是这么个问题，请各路大神帮我分析分析，我第一次做原核表达。（额～本来想发金币表示感谢的，可是我穷，就三十个-_-||，所以。。。）请各路大神不吝赐教，先谢谢啦 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
xuejia174» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有128人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关原核表达载体构建方面的问题
已经有10人回复
- 求助一个关于表达方面的问题
已经有6人回复
- 微软从今天开始停止对Windows XP的更新，用户面临极大安全风险，360舍身担当
已经有2人回复
- 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株
已经有11人回复
- 原核表达换质粒的问题
已经有3人回复
- 新手刚接触原核表达，蛋白Marker没有完全跑出来，请教一下高手，谢谢！
已经有12人回复
- 求助关于原核表达问题（引物设计和实验思路等）
已经有2人回复
- 原核表达引物设计的问题
已经有6人回复
- 表达
已经有8人回复
- 生物领域内的厉害导师，考研的读博的对生物领域内感兴趣的可以看下。
已经有10人回复
- 原核表达引物设计的问题
已经有6人回复
- [原创]民间的抢盐风波,究竟拷打的是谁的脊梁[蓝剑
已经有0人回复
- 【原创】晒一本最近出版的书，图书馆应该有了。。。
已经有20人回复
- 【资源】COMSOL Multiphysics 有关于化学工程和生物医学工程方面的论文
已经有22人回复
great07225388
新虫 (著名写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1510.3
- 散金: 3964
- 红花: 10
- 帖子: 1069
- 在线: 198.7小时
- 虫号: 1049207
- 注册: 2010-06-29
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
4楼2015-07-25 12:19:49
wuwuqaz
木虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1956.1
- 散金: 258
- 红花: 2
- 帖子: 792
- 在线: 97.9小时
- 虫号: 2545799
- 注册: 2013-07-14
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
2楼2015-07-25 11:12:21
3楼2015-07-25 11:17:11
5楼2015-07-25 12:50:19
