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firthzhang铁虫 (初入文坛)
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电泳的marker出问题 已有1人参与
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最近50X的TAE电泳液用完了，自己按照takara的书上配制了1L，但是跑胶的marker一直如下图所示，救命啊，看过帖子，查过文献，从电泳仪到药品都换了，还是不行，而且以前也配过，没有问题，就是最近的出问题了，之前在跑胶时电压90，电流34ma；现在是电压90时电流就变成了100ma。之后把电泳液稀释到0.5X使用电流下来了，但是marker还是老样子，急救啊，后期都快瘫痪了！！！！跪谢大神  不同实验室的胶粉.jpg  超纯水配制电泳液，2000marker.jpg  在别人用别家tae自家胶粉跑电泳（7.21）.jpg  换了电泳液新配.jpg  搞不明白了.jpg |
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firthzhang(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-07-24 10:23:01
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你的maker条带虽然出问题，但是是很有规律的。你的maker的前两条带都基本正常，但是一旦到了第三条以后就随着片段的长度增大而变化增大。也就是说小片段不出问题，而大片段出问题小片段和大片段在胶了的区别是找到问题的门。大片段受到的电场了大，但是随之电场力的增加，阻力增加的程度也就更快，而所有的拖带都是阻力和电场力的相互作用程度超过了一定范围造成的。而阻力的增加程度趋势，和你的带型受影响程度趋势是一致的。电流的改变，电压的影响造成了阻力和电场力的不均衡浮动。大片段分开的慢，在未分开之前带同一种电荷相互作用力时间愈长效果愈差。你打破了新的平衡，电流的变动也就打破力的平衡，片段愈大受影响愈大。个人认为调动电压降电流的效果会比调动电泳液降电流的效果好！在一个你想用的电泳液浓度下调动电压，胶浓度来平衡。个人意见仅供参考。 |
4楼2015-07-23 21:02:54
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