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chenyuanli

木虫 (小有名气)

[求助] 包涵体复性问题 已有2人参与

最近在做包涵体复性,尝试了用稀释复性,从4M Urea开始复性,ph8.0,蛋白的等电点在6.6附近,透析至2M时有沉淀产生,蛋白浓度在0.3mg/ml.
另外,做了稀释复性,向目标蛋白中逐滴加入稀释复性液,4℃,时间14h左右,伴随缓慢搅拌,终浓度为0.1mg/ml,没有沉淀产生,复性结束后,体积大,浓度低。该情况下,如何进一步处理,得到高浓度,小体积的目标蛋白溶液,是过柱子富集,超滤浓缩。。。?在这些过程中会产生沉淀吗?如何有效控制
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嘻哈哈
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恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chenyuanli: 金币+5, ★有帮助 2015-07-27 11:07:50
内容已删除
早上一副睡不醒的样子,下午一副没睡醒的样子,晚上一副打了鸡血的样子!
2楼2015-07-23 16:48:59
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sy0714541

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

浓缩换buffer就好了
浦东新区从事生物医药研发,小硕一枚
3楼2015-08-07 15:52:13
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1510050322

银虫 (初入文坛)

我们是用柱子进行浓缩的。
4楼2015-08-07 21:45:26
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