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千寻@德院

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC,做标准曲线峰面积随浓度变化没有规律怎么办 已有3人参与

求助,在做HPLC时,做标准曲线峰面积随浓度变化没有规律,上样是从最低浓度开始的,峰值很高,但后面随样品浓度逐渐升高,峰面积变化没规律,而且也达不到最低浓度的峰面积。流动相是乙腈:水(75:25),样品也是用流动相稀释的,用的是倍半稀释的方法。谢谢
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ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
同样浓度的样品进三次,重现怎么样?会不会是进样器不准了?洗针液足够吗

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-07-19 17:12:05
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ethernet3399 at 2015-07-19 17:12:05
同样浓度的样品进三次,重现怎么样?会不会是进样器不准了?洗针液足够吗

当时时间有点赶,所以只是一次上样,洗针液先用的纯乙腈洗的,再用样品液洗,
3楼2015-07-19 19:39:32
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sunyifeng186

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这不就是发现问题了嘛,说明在你选的浓度范围内,方法不成线性。第一所选波长吸收太大,第二样品浓度过高。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-07-19 21:30:10
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sunyifeng186 at 2015-07-19 21:30:10
这不就是发现问题了嘛,说明在你选的浓度范围内,方法不成线性。第一所选波长吸收太大,第二样品浓度过高。

我第二次做的时候,每个样品三个重复,但是重复性也不好,而且逢高也不随浓度变大而变化,当然峰面积也不好。还有个问题就是有个杂峰分不开。会是柱效的问题吗?想问一下,峰高在多少比较合适呢,标准品是用流动相配制?谢谢
5楼2015-07-21 21:03:25
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木易十日十月

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上说的有道理,浓度不要太高,超过线性范围,如果满环进样一般不要超1000mAu,重复性不好你做的曲线意义不大。等系统稳定开始进样,杂峰如果对主峰影响较大应尝试改分析条件,。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2015-07-21 21:12:28
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