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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC，做标准曲线峰面积随浓度变化没有规律怎么办
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC，做标准曲线峰面积随浓度变化没有规律怎么办 已有3人参与

求助，在做HPLC时，做标准曲线峰面积随浓度变化没有规律，上样是从最低浓度开始的，峰值很高，但后面随样品浓度逐渐升高，峰面积变化没规律，而且也达不到最低浓度的峰面积。流动相是乙腈：水（75:25），样品也是用流动相稀释的，用的是倍半稀释的方法。谢谢
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1楼 2015-07-19 15:47:29
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ethernet3399

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
同样浓度的样品进三次，重现怎么样？会不会是进样器不准了？洗针液足够吗

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2楼2015-07-19 17:12:05
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ethernet3399 at 2015-07-19 17:12:05
同样浓度的样品进三次，重现怎么样？会不会是进样器不准了？洗针液足够吗

当时时间有点赶，所以只是一次上样，洗针液先用的纯乙腈洗的，再用样品液洗，
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3楼2015-07-19 19:39:32
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sunyifeng186

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这不就是发现问题了嘛，说明在你选的浓度范围内，方法不成线性。第一所选波长吸收太大，第二样品浓度过高。

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4楼2015-07-19 21:30:10
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunyifeng186 at 2015-07-19 21:30:10
这不就是发现问题了嘛，说明在你选的浓度范围内，方法不成线性。第一所选波长吸收太大，第二样品浓度过高。

我第二次做的时候，每个样品三个重复，但是重复性也不好，而且逢高也不随浓度变大而变化，当然峰面积也不好。还有个问题就是有个杂峰分不开。会是柱效的问题吗？想问一下，峰高在多少比较合适呢，标准品是用流动相配制？谢谢
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5楼2015-07-21 21:03:25
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木易十日十月

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上说的有道理，浓度不要太高，超过线性范围，如果满环进样一般不要超1000mAu，重复性不好你做的曲线意义不大。等系统稳定开始进样，杂峰如果对主峰影响较大应尝试改分析条件，。

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6楼2015-07-21 21:12:28
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