24小时热门版块排行榜    

查看: 1993  |  回复: 8

小木棉要努力

木虫 (正式写手)

[求助] 用流式细胞仪测定细菌数量时的染色问题。 已有1人参与

请教各位大侠,用流式细胞仪测定细菌数目、体积时可以用DAPI染色吗?按理能染上色的染料都可以,可为什么身边的同学或文章里大部分都是用Sybr green 1染色呢?可以用DAPI吗?请教请教,稍急!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小木棉要努力: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-07-12 21:45:11
一般细菌不用dapi,dapi是用来染细胞核比较多。而sybr或者syto是一种DNA探针,可以稳定和DNA结合利于定位和分选。dapi一般都要在紫外分段鉴定,好像流式细胞仪紫外不太用吧。反正我没遇到过用紫外波段的。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-07-12 18:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木棉要努力

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-07-12 18:27:20
一般细菌不用dapi,dapi是用来染细胞核比较多。而sybr或者syto是一种DNA探针,可以稳定和DNA结合利于定位和分选。dapi一般都要在紫外分段鉴定,好像流式细胞仪紫外不太用吧。反正我没遇到过用紫外波段的。
...

那流式细胞仪用来测定细菌的数量到底准不准呢?有人说准有人说不准,不好拿捏啊,我之前有用DAPI染色荧光计数,按理那是比较靠谱的方法,但就是效率比较低,数起来费时费力。
3楼2015-07-12 20:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小木棉要努力 at 2015-07-12 20:58:29
那流式细胞仪用来测定细菌的数量到底准不准呢?有人说准有人说不准,不好拿捏啊,我之前有用DAPI染色荧光计数,按理那是比较靠谱的方法,但就是效率比较低,数起来费时费力。...

细菌计数越简单越准确,又荧光又流式的,太麻烦还不准。推荐你用计数板吧。如果溶液澄清可以用od值同步验证。流式做细菌要放磁珠的,每个磁珠吸附量是个范围。。。。你懂的,除非是那种带pcr扩增片段的磁珠是可以定量的,但是宰你没商量的贵啊。是根据你要测的菌种,定制滴,没必要。

[ 发自小木虫客户端 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2015-07-12 21:19:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木棉要努力

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-07-12 21:19:56
细菌计数越简单越准确,又荧光又流式的,太麻烦还不准。推荐你用计数板吧。如果溶液澄清可以用od值同步验证。流式做细菌要放磁珠的,每个磁珠吸附量是个范围。。。。你懂的,除非是那种带pcr扩增片段的磁珠是可以定 ...

非常感谢你!你的回答对我很有帮助,谢谢!
5楼2015-07-12 21:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木棉要努力

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-07-12 21:19:56
细菌计数越简单越准确,又荧光又流式的,太麻烦还不准。推荐你用计数板吧。如果溶液澄清可以用od值同步验证。流式做细菌要放磁珠的,每个磁珠吸附量是个范围。。。。你懂的,除非是那种带pcr扩增片段的磁珠是可以定 ...

顺便问一下,能否告诉我用计数板的简便流程?因为我看文献里很少提及计数板法,一般都是DAPI和流式。
6楼2015-07-12 21:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小木棉要努力 at 2015-07-12 21:46:33
顺便问一下,能否告诉我用计数板的简便流程?因为我看文献里很少提及计数板法,一般都是DAPI和流式。...

http://wenku.baidu.com/link?url= ... SDC7Rin5Qjlrp31eJZ7
7楼2015-07-13 08:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-07-13 08:48:41
http://wenku.baidu.com/link?url=GPrDw3Zzx2fUzry5bEy_KpxaquWls-NVLjt913T9UkF_IfMVZfsNy_5SHSX9TnawnfgVE6NlRG3X0PXYd-bbZAHDSDC7Rin5Qjlrp31eJZ7...

大概1500左右一块,进口的比较准
8楼2015-07-13 08:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木棉要努力

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-07-13 08:49:10
大概1500左右一块,进口的比较准...

好的,谢谢!
9楼2015-07-13 14:50:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小木棉要努力 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学求调剂 +8 苑豆豆 2026-03-20 8/400 2026-03-23 20:57 by baobaoye
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 招08考数学 +6 laoshidan 2026-03-20 14/700 2026-03-23 14:37 by 15614359529
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +3 Promise-jyl 2026-03-23 3/150 2026-03-23 13:43 by wangkm
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
请填处理意见