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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢
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jemmy505210

银虫 (小有名气)

[求助] 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢 已有4人参与

我想用H2DCFDA探针测定纳米材料对细菌细胞内ROS含量测定。。

是不是用荧光分光光度计

具体操作应该怎么做

谢谢
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学习再学习
1楼 2012-06-15 16:44:38
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最近才有学生在我这里做了类似实验，直接取待测细菌样品悬液加ROS探针，流式细胞仪检测荧光强度的变化即可。
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5楼2012-06-17 12:08:10
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shunzhifulin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2012-12-21 16:25:03
我现在也在测，仅用探针或是荧光分光光度计是不行的，要结合起来，探针只是发生反应，反应结果还需借助荧光分光光度计等仪器来检测，我只知道用荧光分光光度计的方法流式细胞仪不会用
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11楼2012-11-18 17:26:32
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普通回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没做过细菌的。不过一般在装载探针后，在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察拍照，可以直观看到ROS迸发，通过对图像处理可以获得定量结果。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2012-06-15 17:53:23
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
H2DCFDA
Ex/Em: ~492–495/517–527 nm
密封干燥保存，现用现配，使用时溶于DMSO，工作浓度在1-10 微摩尔，一般1微摩尔就够，细胞处理时间大约30 min。
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3楼2012-06-15 18:00:51
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张俊亚

木虫 (正式写手)
好高深，没玩过！
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4楼2012-06-16 11:46:49
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jemmy505210

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zdzcqums at 2012-06-17 12:08:10
最近才有学生在我这里做了类似实验，直接取待测细菌样品悬液加ROS探针，流式细胞仪检测荧光强度的变化即可。

用流式细胞仪？，，没有用荧光分光光度计。。结果怎么样
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学习再学习
6楼2012-06-18 20:20:49
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zdzcqums

木虫 (小有名气)
不好意思，没看清原题，流式只能检测相对的变化，具体的含量测定可能还需要其他的技术手段。
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7楼2012-06-19 09:38:24
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380218013

金虫 (小有名气)
哥们找到荧光法的操作步骤了吗？我也想测ROS或者拍照什么的，有的话能不能分享一下啊
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好好生活，努力赚钱
8楼2012-07-15 16:42:39
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e12j

新虫 (小有名气)
请教各位，H2DCFDA使用在实验安全方面有什么要注意的？
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9楼2012-08-01 10:09:43
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leiking

木虫 (正式写手)

中医药
引用回帖:
7楼: Originally posted by zdzcqums at 2012-06-19 09:38:24
不好意思，没看清原题，流式只能检测相对的变化，具体的含量测定可能还需要其他的技术手段。

请问老师，您那边学生做的是怎样来表示相当变化的，是用处理组比对照组后的比值，然后做柱形图还是说加了促氧化的药物然后荧光强度有明显升高？望您能解答，非常感谢了！
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10楼2012-08-02 11:29:40
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