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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢
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jemmy505210

银虫 (小有名气)

[求助] 有没有用荧光探针测定细菌细胞ROS，求实验方法。。新手。谢谢 已有4人参与

我想用H2DCFDA探针测定纳米材料对细菌细胞内ROS含量测定。。

是不是用荧光分光光度计

具体操作应该怎么做

谢谢
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1楼 2012-06-15 16:44:38
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zdzcqums

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最近才有学生在我这里做了类似实验，直接取待测细菌样品悬液加ROS探针，流式细胞仪检测荧光强度的变化即可。
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5楼2012-06-17 12:08:10
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没做过细菌的。不过一般在装载探针后，在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察拍照，可以直观看到ROS迸发，通过对图像处理可以获得定量结果。
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2楼2012-06-15 17:53:23
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
H2DCFDA
Ex/Em: ~492–495/517–527 nm
密封干燥保存，现用现配，使用时溶于DMSO，工作浓度在1-10 微摩尔，一般1微摩尔就够，细胞处理时间大约30 min。
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3楼2012-06-15 18:00:51
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张俊亚

木虫 (正式写手)
好高深，没玩过！
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4楼2012-06-16 11:46:49
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