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ericlintqy

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】CFU怎么测定? 已有16人参与

我第一次接触微生物,看到很多文献都说要把细菌浓度稀释到10的5次方到10的6次方CFU/mL,但是不知道CFU是通过什么方法测出来的,怎么稀释的,希望各位虫虫能指点指点
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xpb2005

银虫 (小有名气)

ericlintqy(金币+1):谢谢 2010-05-10 08:48:34
个人觉得应该是用细胞计数板测定的,
2楼2010-05-10 08:22:44
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重扶残醉

金虫 (正式写手)


ericlintqy(金币+1):谢谢参与
ericlintqy(金币+2):谢谢你,你让我对CFU有了比较深入的了解,但是对它的测量方法稀释平板法还是没有了解 2010-05-10 09:44:35
ericlintqy(金币+1):~~~刚没看到后面的具体操作 2010-05-10 09:46:19
CFU是指菌落形成单位(Colony Forming Units),其实最早期就是(个/ml)这个菌落数单位,就是指单位体积中的活菌个数,因为这种方法是通过稀释平板法获得的活菌数据,而在稀释过程中有可能2个同样的单个细菌并未有效的分开而在琼脂平板上形成同一个菌落(其实不应该是一个菌落,只是重叠的太厉害肉眼等无法检出),因为如果用(个/ml)这个单位,那么测出来的菌体个数其实是偏少的(因为2个被你看成了一个),因此,CFU这个概念应运而出,这样,管你一个菌落是不是代表一个菌,它肯定代表一个菌落单位。sigh...我废话够多的了,就不知道讲清楚没...
具体操作:
1 准备N个灭菌试管
2 在无菌操作台里,从最初的菌悬液中,移液枪吸取0.5ml菌液至第一支试管(管内有无菌水4.5ml,这个记为10-1(稀释倍数),依此类推,做7,8根管子,差不多稀释到平皿里的菌落数在30—300个之间,就差不多咧,然后按照稀释倍数,计算出初始菌液浓度。

[ Last edited by 重扶残醉 on 2010-5-10 at 09:44 ]
7楼2010-05-10 09:29:00
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普通回帖

馨沁

木虫 (小有名气)

ericlintqy(金币+3):谢谢,能不能说的详细一点,是直接数还是测得 2010-05-10 08:49:46
稀释道皿法可以测定活菌数量
3楼2010-05-10 08:39:41
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rszhang

铁杆木虫 (正式写手)

ericlintqy(金币+2):谢谢,能不能说的详细些 2010-05-10 08:50:36
平板稀释法。
4楼2010-05-10 08:42:30
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

ericlintqy(金币+3):谢谢,是稀释后取一定量的菌液涂在固体培养基上在数菌落数啊? 2010-05-10 09:19:32
稀释后涂板,数菌落数
5楼2010-05-10 08:48:37
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gaiyf

金虫 (正式写手)

ericlintqy(金币+3):谢谢,要能够数出菌落数得浓度很稀很稀才行吧? 2010-05-10 09:23:04
CFU是指菌落形成单位,所以在数CFU时要先将菌液涂布到培养基上,等菌落长出来以后再计数。
多看文献,多学知识
6楼2010-05-10 08:53:57
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silicare

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优秀版主


ericlintqy(金币+1):谢谢参与
楼上正解,梯度稀释
8楼2010-05-10 09:53:50
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gaiyf

金虫 (正式写手)


ericlintqy(金币+1):谢谢参与
6楼说的比较明白了,我就不罗嗦了
多看文献,多学知识
9楼2010-05-10 11:07:46
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王珊珊1987

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 重扶残醉 at 2010-05-10 09:29:00:
CFU是指菌落形成单位(Colony Forming Units),其实最早期就是(个/ml)这个菌落数单位,就是指单位体积中的活菌个数,因为这种方法是通过稀释平板法获得的活菌数据,而在稀释过程中有可能2个同样的单个细菌并未有效 ...

这个是10倍稀释法,对吗?没必要一定是1ml稀释到10ml是吗?像你说的05ml到5ml也可以啊?
10楼2010-05-12 13:55:37
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