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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有人用流式细胞仪对细菌进行绝对计数的么？？
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生院深似海

金虫 (初入文坛)

[求助] 有人用流式细胞仪对细菌进行绝对计数的么？？

最近在做这个，但周围人都是用流式细胞仪来看细胞状态的，几乎没人可以交流~故来求个虫友一起探讨探讨，给俺指点一二~谢谢啦~ 想请教下用特异性抗体染色的问题~
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1楼 2013-10-23 22:57:37
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-10-24 23:33:46
你说的特异性抗体染色，就是对细菌进行一个分群，然后计数吧。
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2楼2013-10-24 09:58:39
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leonn

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-10-24 23:33:57
这个可以做的，但是要买带有标准微球的管子，我前段时间咨询过，没有现货
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3楼2013-10-24 09:59:26
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生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-24 09:58:39
你说的特异性抗体染色，就是对细菌进行一个分群，然后计数吧。

是的呢~你做么？大肠杆菌用什么染好呢？？
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4楼2013-10-24 18:23:48
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生院深似海

金虫 (初入文坛)
内容已删除
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5楼2013-10-24 18:26:15
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如楼上说的，你需要标准

但是，目前FCM用在细菌上非常不准确，在计数方面

一般几十um大小以上的细胞才合适
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致良知
6楼2013-10-24 23:53:30
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leonn

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 生院深似海 at 2013-10-24 18:26:15
哦哦 微球算是个内参吧？那是每个样都加，还是说每次实验前加一次校准下机器就行呢？...

这个微球不是校准机器用的，是每个管子里面有固定数量的微球，然后加入你的样品，利用机器给出的计数，通过微球的数量来计算你样品中含有的菌数
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7楼2013-10-25 08:40:10
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生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by leonn at 2013-10-25 08:40:10
这个微球不是校准机器用的，是每个管子里面有固定数量的微球，然后加入你的样品，利用机器给出的计数，通过微球的数量来计算你样品中含有的菌数...

哦哦 懂了~ 那你准备测什么菌呢？？用什么对应的染料呢??最好是特异性的~
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8楼2013-10-26 09:47:20
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leonn

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 生院深似海 at 2013-10-26 09:47:20
哦哦 懂了~ 那你准备测什么菌呢？？用什么对应的染料呢??最好是特异性的~...

我打算测得是混合样品，没有十分特异的染料，PI、DAPI和SYTO都可以吧
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9楼2013-10-27 11:12:52
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