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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 发夹 二聚体
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xincer

木虫 (小有名气)

[求助] 发夹 二聚体 已有1人参与

各位大神怎么看待，同种发夹在退火时形成二聚体的问题？在做HCR（hybridization chain reaction）时形成的二聚体会导致最终的背景信号产生，我在跑单一发夹电泳的时候也观察到了二聚体的条带。请问各位有被这个问题困扰过吗？有什么简易的解决方法呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-06-26 15:13:42
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lanlantuo0

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xincer(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-30 13:16:49
因为在探针合成过程中 发夹不可避免的会二聚三聚
你可以溶链后先淬火 再加样
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2楼2015-06-28 10:31:45
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xincer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lanlantuo0 at 2015-06-28 10:31:45
因为在探针合成过程中 发夹不可避免的会二聚三聚
你可以溶链后先淬火 再加样

可是我熔链后淬火了还是有二聚体，怎么破。

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3楼2015-06-28 12:09:28
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lanlantuo0

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xincer at 2015-06-28 12:09:28
可是我熔链后淬火了还是有二聚体，怎么破。
...

呃 我淬火后跑电泳只有一条带啊
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4楼2015-06-29 08:35:34
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xincer

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lanlantuo0 at 2015-06-29 08:35:34
呃 我淬火后跑电泳只有一条带啊...

其实也不是每次都有二聚体条带，浓度高了就有，低了就看不到了。

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5楼2015-06-29 10:54:05
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lanlantuo0

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xincer at 2015-06-29 10:54:05
其实也不是每次都有二聚体条带，浓度高了就有，低了就看不到了。
...

那你别用太高浓度淬火
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6楼2015-06-30 10:15:32
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