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无形居士2009金虫 (正式写手)
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如何充分形成发卡结构
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| 想把DNA单链通过退火使发卡结构形成,可是跑胶后发现有一部分二聚体的形成~~急求各位大侠们,如何使它形成发卡结构,同时避免二聚体的行程呢?退火温度怎么控制??有经验的同学们分享一下吧~ |
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2楼2012-12-27 09:49:16
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6楼2012-12-27 14:07:45
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【答案】应助回帖
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无形居士2009: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-12-27 16:38:53
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-12-27 16:57:57
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没有PCR仪比较麻烦,需要高温让DNA变性,形成二聚体的DNA解链成单链,慢慢退火降温的复性过程中,就可以最大程度上形成发夹结构,实在不行用干浴锅或者水浴锅代替,一个94度,一个65度,只是这样没有做过,不知道效果怎么样,降温过程不能降得太快,要在退火温度那里停留下,尽量让发夹结构形成,否则还没来得及形成发夹就过温度,立马复性,很多地方随意配对 ,发夹结构就更少了 |
7楼2012-12-27 15:41:21
无形居士2009
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8楼2012-12-27 16:38:17
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