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无形居士2009金虫 (正式写手)
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[求助]
如何充分形成发卡结构
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| 想把DNA单链通过退火使发卡结构形成，可是跑胶后发现有一部分二聚体的形成~~急求各位大侠们，如何使它形成发卡结构，同时避免二聚体的行程呢？退火温度怎么控制？？有经验的同学们分享一下吧~ |
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wen1023tao
铜虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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无形居士2009: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-12-27 16:38:53
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-12-27 16:57:57
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小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-12-27 16:57:57
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没有PCR仪比较麻烦，需要高温让DNA变性，形成二聚体的DNA解链成单链，慢慢退火降温的复性过程中，就可以最大程度上形成发夹结构，实在不行用干浴锅或者水浴锅代替，一个94度，一个65度，只是这样没有做过，不知道效果怎么样，降温过程不能降得太快，要在退火温度那里停留下，尽量让发夹结构形成，否则还没来得及形成发夹就过温度，立马复性，很多地方随意配对 ，发夹结构就更少了 |
7楼2012-12-27 15:41:21
2楼2012-12-27 09:49:16
无形居士2009
金虫 (正式写手)
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3楼2012-12-27 09:51:39
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