24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4476  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

无形居士2009

金虫 (正式写手)

[求助] 如何充分形成发卡结构

想把DNA单链通过退火使发卡结构形成,可是跑胶后发现有一部分二聚体的形成~~急求各位大侠们,如何使它形成发卡结构,同时避免二聚体的行程呢?退火温度怎么控制??有经验的同学们分享一下吧~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongfan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无形居士2009 at 2012-12-27 09:51:39
我不是做pcr的  我就是退货形成发卡结构 不想要二聚体呀 有什么建议么...

不是PCR,而是用PCR仪去做啊,不用PCR怎么annealing呢,
123
4楼2012-12-27 11:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

hongfan

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-27 10:27:51
PCR快速升温至90摄氏度,保持5min,再缓慢降温,每降5度,停2-3分钟
123
2楼2012-12-27 09:49:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无形居士2009

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hongfan at 2012-12-27 09:49:16
PCR快速升温至90摄氏度,保持5min,再缓慢降温,每降5度,停2-3分钟

我不是做pcr的  我就是退货形成发卡结构 不想要二聚体呀 有什么建议么
3楼2012-12-27 09:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wen1023tao

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-27 14:05:09
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-12-27 16:57:45
可以再PCR仪上95度10min,然后缓慢降温到退火温度,65度左右 ,立即拿出来在室温自然缓慢冷却30min,然后做连接
这个是我当时构建RNAi时用的体系,可以试试,希望有所帮助,还有就是要死引物序列不好,形成二聚体是不可避免的
5楼2012-12-27 12:27:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +11 wwwwabcde 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:16 by JourneyLucky
[考研] 化学工程调剂289 +22 yang婷 2026-04-07 23/1150 2026-04-07 22:49 by 来看流星雨10
[考研] 22408 一志愿双一流人工智能300分 四六级,数据分析国奖 +4 zzfeng123 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:02 by zzfeng123
[考博] 博士申请 +3 IQwQl 2026-04-05 3/150 2026-04-07 20:31 by greychen00
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +12 qf626 2026-04-01 12/600 2026-04-06 17:36 by 52305043001
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 生物学求调剂 +5 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-06 11:56 by lijunpoly
[考研] 求调剂 +7 张.1 2026-04-05 7/350 2026-04-05 20:40 by 啵啵啵0119
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 14:46 by 湘农储能材料
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 一志愿山东大学,085600,344 +7 魏子per 2026-04-02 8/400 2026-04-02 21:12 by 百灵童888
[考研] 一志愿北京科技材料科学与工程288分,求调剂 +14 是辰啊 2026-04-02 14/700 2026-04-02 21:10 by dongzh2009
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
信息提示
请填处理意见