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无形居士2009

金虫 (正式写手)

[求助] 如何充分形成发卡结构

想把DNA单链通过退火使发卡结构形成,可是跑胶后发现有一部分二聚体的形成~~急求各位大侠们,如何使它形成发卡结构,同时避免二聚体的行程呢?退火温度怎么控制??有经验的同学们分享一下吧~
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无形居士2009

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wen1023tao at 2012-12-27 15:41:21
没有PCR仪比较麻烦,需要高温让DNA变性,形成二聚体的DNA解链成单链,慢慢退火降温的复性过程中,就可以最大程度上形成发夹结构,实在不行用干浴锅或者水浴锅代替,一个94度,一个65度,只是这样没有做过,不知道效 ...

嗯哪 谢咯  我试试 希望能出现好的结果~~
8楼2012-12-27 16:38:17
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hongfan

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
无形居士2009: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-27 10:27:51
PCR快速升温至90摄氏度,保持5min,再缓慢降温,每降5度,停2-3分钟
123
2楼2012-12-27 09:49:16
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无形居士2009

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hongfan at 2012-12-27 09:49:16
PCR快速升温至90摄氏度,保持5min,再缓慢降温,每降5度,停2-3分钟

我不是做pcr的  我就是退货形成发卡结构 不想要二聚体呀 有什么建议么
3楼2012-12-27 09:51:39
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hongfan

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无形居士2009 at 2012-12-27 09:51:39
我不是做pcr的  我就是退货形成发卡结构 不想要二聚体呀 有什么建议么...

不是PCR,而是用PCR仪去做啊,不用PCR怎么annealing呢,
123
4楼2012-12-27 11:56:55
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