| 查看: 899 | 回复: 3 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
fengjunchen铜虫 (小有名气)
|
[求助]
求帮忙分析土壤DNA提取后断裂的原因 已有1人参与
|
|
|
研一新人，最近在练习从土壤中提取基因组DNA，使用的一种很粗犷的CTAB和SDS提取土壤DNA的方法。之前几次从10g地表土壤中提取DNA，结果都还好，跑胶看看主要在23Kb以上；昨天我尝试了一下把提取的体系放大到250g，结果跑出来胶看看，全都断裂弥散了。 回想这次和之前提取的不同之处，大概回想到这么几点不同，求有经验的师兄师姐们帮忙分析分析。 1、这几天下雨，取的土很湿，所以我60度烘干了大概一个小时。导师说这种高温没准会损害到DNA的完整性。 2、然后我顺便用研钵研磨了一下，不知是否会对DNA的完整性有影响？ 3、体系放大后，沉淀也多了很多，离心后75%乙醇清洗过程中，我用枪头将沉淀片捣碎，动作算是挺轻的。 4、跑胶之前，DNA溶液在4度冰箱里放置了大概20h，不知是否会降解？ 我传了一张跑胶的图片，三条涌道，分别是48Kb的λDNA，λ/HindIII Marker，提取的土壤DNA溶液。 到底是哪步出了问题导致DNA断裂弥散了呢？我很费解。  2015.6.26_副本.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问DNA提取的结果这样的原因
已经有5人回复
- 提取的土壤中的DNA浓度低，纯度也很低怎么改善一下？
已经有11人回复
- 磨土机推荐用于提取土壤总DNA
已经有3人回复
- 求助土壤总DNA提取和16S rDNA扩增
已经有15人回复
- 提取土壤微生物中的基因组，为什么DNA片段总是比预期的要小呢？急急急，求解答。。。
已经有7人回复
- 麻烦帮忙看下土壤基因组DNA电泳图
已经有3人回复
- 土壤样品保存（用于提取ＤＮＡ后下游分子生物学实验）
已经有8人回复
- 用试剂盒提土壤DNA,一般振荡多长时间呢？
已经有16人回复
- 由于土壤样品量较多，寻求土壤DNA的快速提取方法！
已经有18人回复
- 各种提取土壤DNA的试剂盒，那个更好
已经有20人回复
- 土壤中微量ＤＮＡ的提取
已经有8人回复
- 土壤微生物DNA提取不出来，是什么原因？
已经有19人回复
- 为何CTAB法提取的DNA总是断裂？
已经有40人回复
- 湿地植物根际土壤微生物总DNA提取
已经有6人回复
- 大家帮忙看看提取土壤DNA
已经有10人回复
- 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片
已经有7人回复
- 提取土壤DNA，如何去除腐殖质等PCR抑制物？
已经有17人回复
- 求助 土壤基因组 PCR 扩增问题
已经有30人回复
- 土壤微生物DNA提取
已经有4人回复
- 【求助/交流】土壤总DNA的离心柱纯化问题
已经有15人回复
4楼2015-06-28 01:45:32
2楼2015-06-27 05:18:01
fengjunchen
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 745.1
- 红花: 2
- 帖子: 136
- 在线: 77.2小时
- 虫号: 3548432
- 注册: 2014-11-20
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
3楼2015-06-27 16:00:22
20