应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 土壤样品保存（用于提取ＤＮＡ后下游分子生物学实验）
91/1返回列表
查看: 2173  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lhf903

金虫 (正式写手)

[求助] 土壤样品保存（用于提取ＤＮＡ后下游分子生物学实验）

土样的保存一般都是放在-70℃长期保存，现在我的一份土样在-70℃冰箱中放了两年，其间拿出来冻融过一次，还阴干了一个晚上，含水率降到了10%左右。现在拿来提取土壤总DNA，扩增真菌18S rRNA基因，P不出来~
不知道什么原因，会不会是时间过长，样品出现问题，急求解答～
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-07 15:55:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

miaoz2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-11-07 19:15:51
应该不会，可能是你的PCR程序什么的设置不恰当什么的，你需要在重新调整PCR配方，或者调整程序。即使样品出现问题，应该会有东西的。
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-07 16:49:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by miaoz2011 at 2013-11-07 16:49:31
应该不会，可能是你的PCR程序什么的设置不恰当什么的，你需要在重新调整PCR配方，或者调整程序。即使样品出现问题，应该会有东西的。

关键是同样的程序，其他样品可以扩出来
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-07 18:57:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

better2023

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-11-08 01:33:16
PCR之前，总DNA跑一次胶，看看提出来没有
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-07 19:26:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by better2023 at 2013-11-07 19:26:27
PCR之前，总DNA跑一次胶，看看提出来没有

跑过，总DNA没有问题，扩增其他基因也没问题
赞一下 回复此楼
5楼2013-11-07 20:19:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

miaoz2011

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-11-08 01:33:24
lhf903: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-11-14 12:04:02
还有一种原因可能是土壤里没有真菌，这个也是有可能的
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-07 21:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Hazel张健

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-08 01:33:30
lhf903: 金币+10, ★有帮助 2013-11-14 12:03:56
有没有试过取第一次PCR产物作为模板再次进行PCR？！有时候第二次可以出来了~~第一次的产物浓度太低不足以在琼脂糖凝胶电泳上验证出来~~~
赞一下 回复此楼
7楼2013-11-07 21:22:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Hazel张健 at 2013-11-07 21:22:31
有没有试过取第一次PCR产物作为模板再次进行PCR？！有时候第二次可以出来了~~第一次的产物浓度太低不足以在琼脂糖凝胶电泳上验证出来~~~

我取5ul PCR产物跑琼脂糖，没有；如果二次PCR的话，特异性会不会不行啊，偏差会被放大吧~
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-07 21:26:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by miaoz2011 at 2013-11-07 21:21:15
还有一种原因可能是土壤里没有真菌，这个也是有可能的

这个土壤样品中间提取过一次，能扩出真菌来，后来又在-70℃放置了好久，这次拿出来就不行了~
赞一下 回复此楼
9楼2013-11-07 21:28:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lhf903 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +12 不知道叫什么！ 2026-03-15 14/700 2026-03-16 16:45 by 我的船我的海
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 求调剂，一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 一志愿湖师大化学289求调剂 +6 XMCMM3.14159 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:28 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭