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cyymm

木虫 (初入文坛)

[求助] 求助!植物组化问题 已有2人参与

请问大家我现在做植物组化,能切出来,但微波修复时脱片很严重 ,这该怎么办呢?
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mutant

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cyymm at 2015-06-17 08:36:26
谢谢回复
再请教下我做的是玉米粉的组化,一般切多少厚度可以呢?
我现在切的是有点厚,9、10um了,但是是包埋条件优化过了切出来的...

9,10um 差不多了,我当时做的种子切片,也是很硬的,另外一点你材料石蜡包埋的效果如何?切片时有没有破裂什么的,假如这种情况都没有的话,那就是组化粘片的问题了,还有你微博修复时也不能太剧烈了,不然肯定也会掉片,

采用微波修复法,将组织玻片放入耐高温载玻架上,然后放入柠檬酸盐抗原修复液中,微波加热修复,温度维持在95℃左右,6min后观察修复液是否减少,如有减少,用蒸馏水补足到原来体积,继续加热5min。冷却至室温后,用PBST(pH7.4)冲洗3次,每次5min。


这是我硕士论文里组化微博修复的方法,当时实验结果还算可以吧,所以希望对你有用,可以借鉴下!
7楼2015-06-29 11:08:14
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把玻片用多聚赖氨酸处理。
2楼2015-06-16 17:02:44
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银绳

木虫 (著名写手)

植物菜鸟

引用回帖:
2楼: Originally posted by q317476148 at 2015-06-16 17:02:44
把玻片用多聚赖氨酸处理。

啥时候教教俺,想学习下
爱好植物,但是是一只菜鸟!
3楼2015-06-16 18:16:31
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mutant

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cyymm: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2015-06-23 10:31:16
切片不要太厚;主要原因就是建议你使用多聚赖氨酸处理过的防脱载玻片,组化专用的,其次就是烤片的时候,建议在60度作用烤一个小时左右,这样材料在切片上会粘的更牢固。
4楼2015-06-16 19:53:51
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