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绿草如茵

木虫 (小有名气)

[求助] 求助植物组织石蜡切片问题,急急急

大家好,我准备做原位杂交,今天包埋后切片,切片时发现切片上有划痕,片子还常破,脱蜡后观察组织,发现根的横切面组织已经松散了,有的细胞脱落(见附件),请问是什么原因啊?求指点,不胜感激!
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  • 附件 1 : 切片横截面.doc
  • 2012-10-24 21:38:13, 735.5 K

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路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般都是透化没有做好,或者刀口不够锋利造成的。
天道酬勤!
2楼2012-10-25 09:12:13
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感恩小羊

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉像是透蜡的问题。但是包埋呢?组织周围与石蜡之间如果有空隙也会这样吧!
3楼2012-10-25 11:05:28
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绿草如茵

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by netscaner at 2012-10-25 09:12:13
一般都是透化没有做好,或者刀口不够锋利造成的。

透化?我还没有做到透化吧,是切片脱蜡后直接观察的 看看自己制片的效果的,谢谢!我练习切片的,当时更换了好几个刀片!
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
4楼2012-10-25 15:53:53
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绿草如茵

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 感恩小羊 at 2012-10-25 11:05:28
感觉像是透蜡的问题。但是包埋呢?组织周围与石蜡之间如果有空隙也会这样吧!

透蜡.?是浸蜡没有做好吗?
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
5楼2012-10-25 15:54:45
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言午许

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

以前实验也出现过这样的问题,应该是浸蜡那部分没做好,浸蜡的时间要久一些,而且不能使高浓度蜡直接接触材料,会导致脆化;另外刀片也可能导致,如果已经更换了刀片,不妨试试调整一下切片时刀片的角度。。。
6楼2012-10-29 14:14:16
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绿草如茵

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 言午许 at 2012-10-29 14:14:16
以前实验也出现过这样的问题,应该是浸蜡那部分没做好,浸蜡的时间要久一些,而且不能使高浓度蜡直接接触材料,会导致脆化;另外刀片也可能导致,如果已经更换了刀片,不妨试试调整一下切片时刀片的角度。。。

谢谢,请问高浓度蜡是什么意思?是原始的蜡吗?你们做的时候还用了低浓度的蜡?低浓度的蜡怎么得来的呢?不胜感激!
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索!
7楼2012-10-29 18:38:17
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npp植物学

新虫 (初入文坛)

浸蜡的时候,先换上纯的二甲苯后,加入少量碎蜡,摇匀,放入36℃温箱中,每12h加一次碎蜡块,持续三四天。然后逐渐曾加温度(可以每小时增加2℃),直至温度达到58℃,然后,58℃下,分两次换入纯净石蜡,使其充分渗蜡。
8楼2013-05-09 11:41:53
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小雪初晴

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浸蜡时没有让蜡完全浸入植物组织内部
9楼2013-06-21 21:58:58
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