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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 石蜡切片切的时候容易碎
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西瓜and华华

新虫 (初入文坛)

[求助] 石蜡切片切的时候容易碎

我做石蜡包埋，材料是香蕉皮，取材时是切3mm厚于固定液中，然后抽气1h，酒精梯度脱水（50%，70%，90%，100%）,每次30min，然后浸蜡，分别是50%过夜，70%蜡3h，90%蜡2h，100%蜡2h（两次），最后包埋后放于20摄氏度凝固，第二天转到4°。切片时纯蜡的部分能切完整，但是到材料时，就容易粘在一起，材料部分不完整，是碎的，为什么？还有我想问哈包埋的时候在冷却的过程中蜡的冷凝状态是什么样子的，我怀疑是脱水不够，如果是脱水时间太短，在包埋的过程中可以发现不，比如包埋中出现气泡？求助中，急急急，谢谢啦！
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1楼2011-09-03 20:09:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

万有引力

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-09-12 11:45:57
石蜡和酒精是不相容的  一般最好用二甲苯透明下 把酒精除掉 二甲苯和石蜡是相容的
不知道这样行不行哦
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4楼2011-09-08 16:14:21
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普通回帖

sheryl99

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-09-12 11:46:10
好像是脱水时间有点短啊，还有就是100%石蜡时间应该延长点，弱弱问一句，你这个切片不用透明吗
？
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忧愁请远离我
2楼2011-09-08 09:37:42
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西瓜and华华

新虫 (初入文坛)
我们实验室做这个实验都不用透明的，我们不用二甲苯，透明应该是为了拍片服务的，我们之前不用都拍的很好看。谢谢你的意见，我尝试延长试试
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3楼2011-09-08 15:14:25
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西瓜and华华

新虫 (初入文坛)
谢谢你们啦，我试试
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5楼2011-09-11 23:05:03
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xiajm

铁虫 (小有名气)
请问有谁知道防脱片使用什么药剂，是蛋白甘油吗？还是其他？谢谢了！！！
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6楼2012-03-25 00:29:17
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appbottle

铁虫 (初入文坛)
★
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖！ 2012-07-22 21:12:44
引用回帖:
1346012楼: Originally posted by 西瓜and华华 at 2011-09-11 23:05:03:
谢谢你们啦，我试试

我做的是蛋白甘油，鸡蛋清和甘油一比一的比例混合均匀。沾取少量于载玻片上（一定少量），涂抹均匀，半小时后使用就OK了！
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7楼2012-03-25 12:25:11
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XY屋宇

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果水没有脱干净，会出现白色混浊状，一般出现在组织周围或底部。另外，酒精100%应该两次，二甲苯还是应该用的，不只是透明作用，还有作为酒精和石蜡的中介。
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8楼2012-04-19 16:59:45
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eargle

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主的问题是：脱水没有脱干净，应该在低浓度酒精延长几个小时看看，还有你在用梯度石蜡浸蜡是，很可能是蜡没有完全浸进去。我不知道你是用什么配的各梯度蜡的，若你透化用的是二甲苯，你就用二甲苯与石蜡配（1：1）就可以直接到低熔点石蜡再到高熔点 石蜡了，时间你要试一下，二甲苯与石蜡配（1：1）最好不好超过2小时，高熔点石蜡最好过夜。
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结识每个虫友，将是我的又一大荣幸！
9楼2012-07-17 12:37:09
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维叶萋萋

金虫 (小有名气)

小公主

【答案】应助回帖

我是做樱桃花芽的石蜡切片，FAA抽气固定，做时先流水冲洗过夜，第二天，酒精梯度脱水（50%1h，70%2h，85%1.5h，95%%1h,100%1h,100%1h）,然后浸蜡，分别是50%过夜，75%蜡4h，87.5%蜡4h，93%蜡过夜，第三天包埋。可是做出来老是脆的一切就碎，连石蜡都是脆的，为什么呢？这几天就在做，很急，谢谢！
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三山半落青天外，二水中分白鹭洲。
10楼2012-07-22 19:10:13
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