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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 高效液相条件摸索
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德芙的诱惑

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相条件摸索 已有7人参与

本人最近做液相，用的是甲醇-0.1%醋酸梯度洗脱样品，初始比例是10:90，对照品和样品的色谱峰只在1.6min就出完了，后面都没峰了，后来换成20:80，情况差不多，跪求各位大神！！！急急急
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天人合一
1楼 2015-06-07 16:41:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
德芙的诱惑: 金币+5 2015-06-27 19:55:58
如果你的是反相柱，提高流动相的极性（无机相比例）可增加化合物的保留时间（正相柱反之），一般情况下，有机相每降低10%，保留时间延长大约3倍。但是你的流动相为反相色谱使用的流动相，而且你的无机相已经达到90%的情况下，色谱峰都保留不住，你应该考虑是否需要换柱子了，换另一种填料或者更长的柱子。你也可以考虑将无机相比例继续提高（但是空间已经很小），或者调节流动相pH值（只对酸碱化合物管用），或者往流动相中加入表面活性剂进行离子交换洗脱（只有会解离的化合物管用）
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微信公众号：Pharmaguider（药事纵横），主页：www.pharmaguider.cn
2楼2015-06-08 08:54:24
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hr.wu

新虫 (小有名气)
根据老夫多年来犯错的经验来看，楼主这是把流动相的瓶子放反了。
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8楼2015-06-08 16:49:57
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普通回帖

czzlnkar

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
都已经到10甲醇了还存不住，那就得考虑换柱子了，纯水无甲醇洗柱子会把柱子洗坏，甲醇多了出峰速度更快
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3楼2015-06-08 10:50:27
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德芙的诱惑

金虫 (小有名气)
是不是柱子坏了啊？我走乙腈系统都不会这样，另外，我的色谱柱是短柱

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天人合一
4楼2015-06-08 11:23:53
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fly6565

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
10%甲醇迅速出峰，你的化合物极性看来较大，在普通C18上调整的空间很小，可以考虑试一下hilic模式的色谱柱，可走纯水
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5楼2015-06-08 15:07:53
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我爱猫儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原因可能有很多，先走一针不加醋酸的，或许可能是加酸后不保留。
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6楼2015-06-08 15:53:30
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德芙的诱惑

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 我爱猫儿 at 2015-06-08 15:53:30
原因可能有很多，先走一针不加醋酸的，或许可能是加酸后不保留。

我走的是黄酮类成分、之前走的就是这个系统，都还挺好的，现在无论走对照品还是样品都是只出一个峰

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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天人合一
7楼2015-06-08 16:24:53
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德芙的诱惑

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by hr.wu at 2015-06-08 16:49:57
根据老夫多年来犯错的经验来看，楼主这是把流动相的瓶子放反了。

都检查过了，没有

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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天人合一
9楼2015-06-08 17:36:04
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476054377

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
走个长柱看看？你的是哪类物质的？要不换条亲水性的柱子看看？
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10楼2015-06-08 19:24:34
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