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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 根据mRNA设计的引物 用gDNA做模板能否扩增出目的片段？
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Cindycclove

新虫 (小有名气)

[交流] 根据mRNA设计的引物 用gDNA做模板能否扩增出目的片段？ 已有3人参与

如题，另外，如何在genebank上检测我的引物是否包含内含子呢？
谢谢大家帮我T-T
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1楼 2015-06-01 17:45:56
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xmcliulei

银虫 (小有名气)
★
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打开UCSC，在in silico PCR中输入你的上下游引物，直接submit，看看产物大小就知道有没有内含子了，顺便还能看看在基因组上的特异性怎么样~
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2楼2015-06-01 23:55:05
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Cindycclove

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xmcliulei at 2015-06-01 23:55:05
打开UCSC，在in silico PCR中输入你的上下游引物，直接submit，看看产物大小就知道有没有内含子了，顺便还能看看在基因组上的特异性怎么样~

要选择基因组genome。这种鸡柔嫩艾美尔球虫 应该选什么啊
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3楼2015-06-04 12:00:09
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piaoyidetian

新虫 (初入文坛)
★
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是要构建载体吗？为什么不用cDNA做template呢？
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4楼2015-06-04 14:03:16
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Cindycclove

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by piaoyidetian at 2015-06-04 14:03:16
是要构建载体吗？为什么不用cDNA做template呢？

因为我的RNA很容易降解啊~
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5楼2015-06-05 14:54:54
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piaoyidetian

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Cindycclove at 2015-06-05 14:54:54
因为我的RNA很容易降解啊~...

RNA都很容易降解的，在提取RNA过程中多注意细节还是能提到高质量的RNA的，可以尝试用OMEGA试剂盒提取，及时反转录
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6楼2015-06-06 16:58:21
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Cindycclove

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by piaoyidetian at 2015-06-06 16:58:21
RNA都很容易降解的，在提取RNA过程中多注意细节还是能提到高质量的RNA的，可以尝试用OMEGA试剂盒提取，及时反转录...

是因为我的样品是保存在储存液里的虫卵，所以跟操作没有关系。它一直在降解。。。
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7楼2015-06-07 12:40:47
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jinnini125

木虫 (小有名气)
植物的怎么分析

发自小木虫IOS客户端
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8楼2017-05-09 15:01:29
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