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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如何计算蛋白大小
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蓝暮稻草人

金虫 (小有名气)

[求助] 如何计算蛋白大小已有3人参与

pET28a原核表达：构建一个重组质粒，888bp大小的目的基因片段插入经过BamHI、Xol I 双酶切的pET28a原核表达载体，保留两个His标签，请问表达出来的融合蛋白的分子量应为多大。
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1楼2015-05-15 10:42:45
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小蚂蚁虫

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
蓝暮稻草人: 金币+1, ★有帮助 2015-05-29 21:02:09
你表达出来的目的片段加上你的标记 然后按平均分子量来计算就可以了啊
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3楼2015-05-15 12:13:59
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝暮稻草人: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-05-29 21:02:00
用平均分子量计算的话就是，888/3×110.32kd左右。另外，不知道你做的是什么蛋白，相关网站应该有给出的

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
2楼2015-05-15 11:32:19
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huachijin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝暮稻草人: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-05-29 21:02:15
可以把核酸序列翻译成氨基酸序列，然后在：ttp://web.expasy.org/compute_pi/ 估算下分子量。
电泳显示的分子量和预测的可能会不一致，这个和蛋白的修饰，电泳所用的胶，还有缓冲液等有关。
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4楼2015-05-15 20:18:08
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